硫蛋白检测实验室，金属硫蛋白MT检测，CMA/CNAS资质

硫蛋白，通常指的是金属硫蛋白（metallothionein，缩写为MT），是一类在生物体内普遍存在的蛋白质。金属硫蛋白的特点是含有多个巯基，能够结合多种重金属离子，如镉、铜、铅、锌等，从而降低这些重金属离子对生物体的毒性。它们在细胞内调节微量元素如锌和铜的水平，并在保护细胞免受重金属损伤方面发挥重要作用。金属硫蛋白能够快速进入生物体的各个脏器，与重金属离子结合后，通过尿液、粪便、头发、指甲等途径排出体外。金属硫蛋白还在大脑神经系统中广泛存在，具有清除重金属、调节微量元素平衡、促进生长发育等多种生理作用。金属硫蛋白在人体、动物、植物以及微生物体内均有所存在，但其含量通常非常微少，难以通过现有技术提取或人工合成。在临床医疗中使用的金属硫蛋白通常是通过给家兔或小猪注射刺激物诱导其体内产生，提取得到的。

关于硫蛋白，北京清析技术研究院可提供总蛋白、硫氨基酸、溶解度、还原性、氧化性、亮氨酸、甲硫氨酸、乙硫氨酸、半胱氨酸、囊氨酸、巯基组分、硫醇含量、二硫键含量、硫酸含量、硫化物含量、二硫酸含量、硫醇基含量、巯基含量、巯基氧化物含量、巯基消耗量等检测项目。北京清析技术研究院可对食品、保健品、生物制品、化妆品、环境样品、药物、农产品、水产品、畜禽产品、饲料、石油产品、化工产品、原料及成品等进行硫蛋白的检测。

检测方法

1、金属亲和分析法

这类方法主要是基于MT对金属的高亲合力且不同金属的亲和力具有差异性及其热稳定性而建立的。主要通过测定MT结合金属—竞争性替换金属含量来检测MT中金属含量的增高，从而计算出MT的含量。张保林等运用银饱和分析法结合原子吸收光谱（AAS）检测了兔肝Zn-MT，具体方法为：向含MT的溶液中加入过量的Ag+，待反应完全后，再逐次加入血红蛋白，以结合剩余的Ag+，加热使血红蛋白沉淀，与MT结合的Ag+则完全存在于上清液中，通过AAS测定其中Ag+含量，便可计算出MT的浓度。

2、电化学法

此方法主要是利用巯基（-SH）在汞滴表面产生氧化还原出现的电位变化建立的，以测定巯基来计算MT的含量，是一种可以直接用于测定MT总量的方法，具有一定的特异性。其检测限可达ng/ml水平。

运用检测MT的电化学方法有：示差脉冲极谱法（DPP）、微分脉冲极谱法、示差脉冲阳极溶出伏安法（DPASV）和循环伏安法（CV）等。Bordin等通过改变检测体系的pH值，利用DPP可以很方便地检测出样品中多种形式的MT，能快捷地分析出还原型的MT。

3、色谱分析法

对MT中不同亚型的检测，色谱分析法较为适合，应用的色谱分析法主要有HPLC、RP-HPLC、HPLC-ICP-MS、HPLC-AAS等，利用这类分析方法可以对Zn-MT的性质进行检测分析，但此类方法需要有标准的MT样品进行对照。Hunziker等使用RP-HPLC从兔组织样品中可以分离出7种亚型，通过AAS来检测样品中的金属含量，可以对MT进行定量测定。Jin等利用HPLC分离MT，根据样品对250nm紫外吸收特征来直接对MT定量，该方法的灵敏度小于1μg/mL。由于常见的两种MT所带的电荷不同，与其它方法相比，利用毛细管电泳法可以更好地分离纯化MT-Ⅰ和MT-Ⅱ。

4、光谱法

采用液相色谱（LC）和紫外（UV）相结合检测确定家兔肝脏中分离脱金属硫蛋白的良好条件，利用LC-ES-MS可以确定家兔肝脏中不同结构的脱金属硫蛋白，主要对MT-Ⅰ和MT-Ⅱ的结构及其同分异构体进行了研究。

由于目前金属硫蛋白的测定主要采用紫外-可见分光光度法以及原子吸收光谱法测定其中的金属离子。前一种方法灵敏度较低，由于检测取样少，检测过程中造成的误差较大，后一种方法却因为分离纯化过程中可能有部分金属脱离蛋白造成损失引起误差，且测定费用昂贵。针对这种情况，建立了镉金属硫蛋白的非原子化测定方法，检出限与石墨炉法（GFAAS）相近。

检测标准

1、DB23/T 1686-2016 植物中金属硫蛋白的测定方法

2、GB/T 38086-2019 生物样品中金属硫蛋白含量的测定