蔗糖酶又称“转化酶”。糖苷酶之一,蔗糖酶(invertase)(β-D-呋喃果糖苷水解酶)(fructofuranosidefructohydrolase)(EC.3.2.1.26)特异地催化非还原糖中的β-D-呋喃果糖苷键水解,具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,也能催化棉子糖水解,生成密二糖和果糖。
植物中蔗糖酶的分类
根据植物中蔗糖酶所处亚细胞位置,蔗糖酶可分为液胞型蔗糖酶、细胞质型蔗糖酶和细胞壁型蔗糖酶。前两者又统称为胞内蔗糖酶,细胞壁型蔗糖酶又被称为胞外蔗糖酶。不同的蔗糖酶进行反应所需的适宜pH值也有所不同,由此蔗糖酶又可分为酸性蔗糖酶和中性/碱性蔗糖酶。液胞型蔗糖酶和细胞壁型蔗糖酶在pH4 .5 至5 .0时催化效率高,也称为酸性蔗糖酶。细胞质型蔗糖酶水解蔗糖的适宜pH值为中性或略微偏碱性,称为中性/碱性蔗糖酶。而根据其溶解性,蔗糖酶又可分为可溶性蔗糖酶(包括液胞型蔗糖酶和细胞质型蔗糖酶)与非溶性蔗糖酶(细胞壁型蔗糖酶)。
关于蔗糖酶,北京清析技术研究院可提供蔗糖酶含量测定、蔗糖酶活性检测等检测项目。北京清析技术研究院可对蜂蜜、食品、奶制品、冰淇淋、糖果、水果汁、蔬菜汁等进行蔗糖酶的检测。
检测方法
1、样品提取
在110℃烘箱烘15min,调制70℃烘干至恒重。实验材料(各种植物叶片或种子)磨碎后,秤取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml 80%乙醇,至于80℃水浴中不断 搅拌40min,离心,收集上清液,其残渣加2ml 80%乙醇重复提2次,合并上清液。80%乙醇定容至10ml,过滤后去滤液测定。
2、制作标准曲线
取蔗糖标准液用80%乙醇稀释成系列(0、10、20、30、40、60、80、100ug/ml)浓度的溶液。分别取0.4ml溶液,各自加入200ul 2mol/L NaOH,100℃煮沸5min,冷却,加入2.8ml 30%HCl,0.8ml0.1%间苯二酚,摇匀,80℃水浴反映10min,冷却后再480nm测定OD值,以0浓度管调零。绘制蔗糖浓度-OD值曲线。
3、显色测定
取提取液0.4ml,按上述步骤进行蔗糖含量的测定,读取OD值,并从标准曲线得到提取液中的糖含量,再进行计算样品中的蔗糖含量。
检测标准
1、GOST R 54386-2011蜂蜜.蔗糖酶活性,淀粉酶活性和不溶解物质的测定方法
2、DIN 10759:2016蜂蜜的分析研究.蔗糖酶活性的测定.西根哈勒法
3、T/NAIA 010-2020 土壤蔗糖酶活性的测定3,5-二硝基水杨酸比色法