蛋白免疫印迹检测实验室，免疫印迹CMA/CNAS机构

是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测，可以比较多个样品同种蛋白的表达量差异。

优点

1 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作；

2 固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近,不会象凝胶那样受孔径阻隔；

3 免疫印迹分析只需少量试剂；

4 孵育、洗涤的时间明显减短；

5 可制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定；

6 结果以图谱形式可长期保存；

7 免疫探针可通过降低PH值等方法, 象抹去录音磁带一样将探针抹掉,再换用第二探针进行分析检测。

关于蛋白免疫印迹，北京清析技术研究院可提供异常朊蛋白，甲胎蛋白变异体，兔骨组织总蛋白，大鼠肝组织中P-糖蛋白，上皮钙粘蛋白，表面活性蛋白，蛋白抗体，病毒抗体，大鼠脑组织中P-糖蛋白，绵羊朊蛋白等检测项目。

方法步骤

1.蛋白质分离

将待测样品进行电泳分离。通常使用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行分离，根据蛋白质的分子量大小将其分离成不同的带状条带。 

2.转印

将蛋白质从凝胶转移到固定膜上。这个步骤通常使用西方半湿法或湿法转印，将凝胶和膜夹在一起，通过电流使蛋白质从凝胶逐渐转移到膜上。 

3.阻断

为了减少非特异性结合，需要用饱和蛋白或其他蛋白质进行膜的阻断。常见的阻断剂包括牛血清白蛋白（BSA）或非脂干奶粉。 

4.抗体结合

将特异性的一抗加入到含有阻断剂的缓冲液中，将膜与抗体溶液一同孵育，使抗体与目标蛋白质结合。 

5.清洗

将膜用洗涤缓冲液洗涤，以去除未结合的抗体和其他非特异性的成分。 

6.检测

将抗体标记物（如荧光素、辣根过氧化物酶等）加入到膜上，使其与结合的抗体发生特异性反应。通过荧光素的化学反应或辣根过氧化物酶底物的显色反应来产生可见的信号。这些信号可以通过数字成像系统进行记录和分析。 

检测标准

1、SN/T 2206.7-2010化妆品微生物检验方法.第7部分:蛋白免疫印迹法检测疯牛病病原

2、GB/T 40225-2021 肌动蛋白抗体的检测 免疫印迹法

3、GB/T 38477-2020 基因表达的测定 蛋白印迹法