DPPH自由基清除原理的机制主要是通过DPPH分子与自由基发生反应，将自由基转化为稳定的分子，从而达到清除自由基的目的。DPPH分子是一种紫色的有机自由基，其分子结构中含有一个未成对的氮原子，使其呈现出明显的紫色。当DPPH分子遇到自由基时，自由基会与DPPH分子发生反应，将DPPH分子的未成对电子与自由基中的未成对电子结合，使DPPH分子从紫色变为无色，同时将自由基转化为稳定的分子。这个过程是一个氧化还原反应，也是DPPH自由基清除原理的基本机制。
检测方法
1.分光光度法
分光光度法是一种常用的检测方法，基本原理是通过测量化合物与DPPH反应后的溶液吸光度的变化来评估清除DPPH自由基能力。实验过程如下：
1）准备1mM的DPPH乙醇溶液。
2）将待测化合物按一定浓度体系添加到相应的试管中。
3）将相同体积的DPPH溶液加入到每个试管中，混匀。
4）放置在室温下，静置反应30分钟。
5）使用紫外可见分光光度计测量反应体系的吸光度，计算清除率。
2.电子顺磁共振法（EPR）
电子顺磁共振法是另一种常用的方法，通过测量化合物对DPPH自由基的清除能力，进而评估其抗氧化活性。实验过程如下：
1）准备含有DPPH和待测化合物的溶液。
2）使用电子顺磁共振仪测量样品的EPR信号，同时测量含有DPPH和不含DPPH的样品作为参比。
3）通过比较样品与参比的EPR信号来计算清除率。
3.原子力显微镜方法（AFM）
原子力显微镜方法是一种非常灵敏的方法，可以用于直接观察化合物对DPPH自由基的清除作用。实验过程如下：
1）制备DPPH自由基薄膜。
2）将待测化合物沉积到DPPH自由基薄膜上。
3）使用原子力显微镜观察样品的表面形态变化。
4）通过观察DPPH颜色的变化和表面形态的变化来评估清除率。
4.荧光法
荧光法是一种快速、灵敏且简便的检测方法，利用化合物与DPPH反应后荧光上转换的变化来评估清除DPPH自由基能力。实验过程如下：
1）制备DPPH乙醇溶液。
2）将待测化合物与DPPH溶液混合。
3）使用荧光光谱仪测量样品的荧光强度的变化。
4）通过荧光强度的变化来计算清除率。
检测标准
1、T/AHFIA 069-2022 白酒DPPH自由基清除率的测定酶标仪法
2、T/SHRH 006-2018化妆品-自由基（DPPH）清除实验方法
