枯草芽孢杆菌PCR检测，枯草芽孢杆菌数测定

枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种，CAS号68038-70-0。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，可形成内生抗逆芽孢，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。生长、繁殖速度较快，菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭，是一种需氧菌。

关于枯草芽孢杆菌，北京清析技术研究院可提供成分分析、含量检测、菌落总数检测、性能检测、代谢产物、溶菌作用、耗氧量、活菌数、含菌量、菌落计数、孢子形态、产孢能力、耐热性、毒力检测、抗生素敏感性、基因分型、生长条件、产生酶的能力、耐药性检测、致病机制研究、环境适应性、抗氧化能力、生物防治潜力检测、遗传变异分析、产生挥发性化合物、菌株鉴定、生物膜形成、产生抗生素的能力、菌株保存等检测项目。北京清析技术研究院可对农用枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌粉、枯草芽孢杆菌培养皿、枯草芽孢杆菌杀菌剂、枯草芽孢杆菌喷雾剂、枯草芽孢杆菌菌剂等进行检测。

鉴定方法

1. 形态学观察

采用显微镜观察培养得到的枯草芽孢杆菌菌落和孢子的形态特征。枯草芽孢杆菌形成的菌落通常为凹陷型或突起型，孢子则呈椭圆形，具有芽胞的特征。 

2. 细胞染色

将培养得到的枯草芽孢杆菌菌落取出，进行细胞染色。常用的方法是使用革兰氏染色和孢子染色。革兰氏染色可用于观察细菌细胞的染色性质和形态特征，孢子染色则可用于观察细菌芽胞的形态特征。 

3. 生理生化特征检测

通过生理和生化实验，检测枯草芽孢杆菌的一些代谢特征。包括对碳源的利用情况、产酶的能力、乳酸发酵能力等。常用方法包括碳源利用试验、酶活性测试、氧化还原试验等。 

4. 分子生物学鉴定

可以通过PCR、16SrRNA基因测序等分子方法对枯草芽孢杆菌进行鉴定。PCR可以扩增目标基因区域，确认分离得到的菌株是否为枯草芽孢杆菌。16SrRNA基因测序可以通过比对数据库，确认菌株的物种归属。 

检测标准

1、NY/T 2293.1-2012 细菌微生物农药 枯草芽孢杆菌第1部分:枯草芽孢杆菌母药

2、NY/T 2293.2-2012 细菌微生物农药 枯草芽孢杆菌第2部分:枯草芽孢杆菌可湿性粉剂

3、NY/T 2131-2012 饲料添加剂.枯草芽孢杆菌

4、SN/T 2728-2010 枯草芽孢杆菌检测鉴定方法

5、DB35/ 420-2000 饲料级枯草芽孢杆菌添加剂

6、GB/T 26428-2010饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测

7、DB22/T 1975.18-2016 农药在人参上的使用准则第18部分：10亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌

8、DB22/T 1975.19-2016 农药在人参上的使用准则第19部分：1000亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌

9、HJ 1190-2021 水质灭菌生物指示物（枯草芽孢杆菌黑色变种）的鉴定 生物学检测法

10、T/SDAQI 062-2021 肥料中枯草芽孢杆菌快速定性的检测方法环介导等温扩增法

11、ASTM E3180-18用菌落生物膜模型生长的由营养细胞和孢子组成的枯草芽孢杆菌生物膜定量的标准试验方法