“敲除”相关哺乳动物基因是研究基因功能或其作为药物靶点潜力的一种重要方法,在阿尔茨海默病、癌症、心血管疾病、炎症或代谢疾病等神经退行性疾病研究中都被广泛应用。CRISPR/Cas9是一种革命性的基因编辑技术,可以jīngquè修改基因组序列。CRISPR是细菌和古细菌中的一种免疫系统,能够识别并切割入侵病毒的基因组。通过引入Cas9蛋白和相应的向导RNA,CRISPR/Cas9技术可以jīngquè定位和切割特定的DNA序列,实现基因敲除、点突变和基因插入。CRISPR/Cas9介导的基因编辑具有巨大的临床应用潜力,随着该技术的日趋成熟,其在药物靶点发现和验证、基因功能研究、基因治疗、癌症免疫疗法等众多领域发挥着越来越重要的作用。
Neil, C.; et al. ACS SyntheticBiology. 2022.
CRISPR/Cas9基因敲除技术
为满足基础研究及医药研发的需求,科研领域急需获得系列靶基因/全基因组的敲除细胞。百泰派克生物科技(BTP)采用优化的CRISPR/Cas9系统为您提供高通量基因敲除服务,我们的人全基因组基因敲除阵列Array文库覆盖了完整的人类全基因组,全基因组阵列敲除库已在人原代细胞全部完成高内涵筛选的验证,超过80%以上的靶点达到70%以上的敲除效率。
BTP致力于为您提供zuì简单易用的高通量CRISPR基因敲除服务,包括病毒包装、质粒制备、Cas9浓度测试等,为您解决选择哪个细胞进行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等关键问题。可进行单/多基因敲除、移码突变和大序列敲除。您只需提供基因名和目标细胞,百泰派克生物科技负责所有项目后续,包括项目评估(靶基因是否在目标细胞中表达、是否是必需基因)、KO实验、KO细胞验证、冻存KO细胞和活KO细胞交付。
服务优势
1.样本适用性强
适用于人、小鼠的细胞系,原代细胞,免疫细胞及iPS细胞等。
2.基因必要性及表达量分析
在进行基因敲除实验前,我们会基于生物信息学和蛋白质组学数据对不同细胞中基因必要性及表达量进行分析,确保实验的可行性,降低实验风险。
3.gRNA无需从头设计和验证
我们完成了人类全基因组gRNA的全部验证,与药物相关的靶点也完成了PCR测序验证,无需针对客户的靶点设计预实验进行gRNA验证,大大缩短了项目周期。
4.高通量高效率
我们采用优化的CRISPR/Cas9系统进行高通量基因敲除,多个sgRNA/靶基因设计保证高敲除效率,超过80%靶点敲除效率在70%以上,短期内(10天内)即可提供高敲除效率的KOpool,满足绝大多数的应用场景。
5.敲除效率双验证
基因敲除后,我们采用WB实验中抗体KO验证的shǒuxuǎn方法——Sanger测序和深度蛋白质组学技术对敲除效率进行双验证,数据真实性的双重保障。
应用案例
1.基因治疗
Dever DP, et al. Nature. 2016.
2.免疫细胞工程
Roth TL, et al. Nature. 2018.
3.基因功能研究
Gordon DE, et al. Science. 2020.
4.药物靶点筛选
Morgens DW, et al. Nat Biotechnol.2016.
常见问题:
问题1.高通量基因敲除技术对比传统基因敲除技术有哪些优势?
回答:高通量基因敲除技术相比传统基因敲除技术如慢病毒包装法和质粒法等有以下优势:
1)编辑通量
传统基因敲除技术:通量低,通常2-3个月完成几十个敲除细胞系的构建;
高通量基因敲除技术:通量高,通常1-2个月即可获得几百个敲除细胞系的构建。
2)编辑效率
传统基因敲除技术:敲除效率在30-90%左右,且不均一;
高通量基因敲除技术:敲除效率很高,可达70-。
3)KO细胞储量
传统基因敲除技术:KO细胞储备不足3000+;
高通量基因敲除技术:人类全基因组覆盖,KO细胞储备高达19000+。
相关服务
高通量基因敲除技术药物筛选和靶点鉴定
高通量基因敲除后代谢组学分析
高通量基因敲除后蛋白组学分析
其他服务项目
优质检测平台
(1)基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台
该平台配备了Agilent 2100生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统,为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航,包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:
(2)基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台
该平台配备了超高效液相色谱质谱联用,Orbitrap Fusion Lumos Tribri,Thermo ScientificExploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段,包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;
(3)生物药物表征平台
该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪,氢气交换质谱仪配备机械臂,为生物药物表征提供了全面的分析手段,包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:
(4)基于10x Genomics的单细胞分析平台
该平台能够完成基于10xGenomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;
(5)基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台
采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry Systemfor Single CellAnalysis)用于单细胞质谱分析,该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;
(6)基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台
基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台,能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;
(7)生信云平台
基于生物信息分析方法的生信云平台,能够完成一整套的生物信息学解决方案,包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
1.公司采用ISO9001质量控制体系,zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
5.服务3000+企业,10000+客户的选择;
6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!