Zui小抑菌浓度指用试管稀释法测定细菌对药物的敏感性。完全抑制细菌生长的Zui高稀释管1毫升所含的药量。亦即被测细菌对该药的敏感度。因药物和细菌的种类不同,需具体规定药物的稀释范围使用培养基的种类、加菌量,培养条件和判定结果的时间。
关于Zui小抑菌浓度,北京清析技术研究院可提供Zui小抑菌浓度、微生物总数、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、霉菌和酵母菌、水分、灰分、酸价、过氧化值、酯值、糖类、蛋白质、氨基氮、脂肪酸酯、挥发性酚、亚硝酸盐、重金属、甲醛、菌落总数等检测项目。北京清析技术研究院可对食品、药品、饲料、乳制品、化妆品、医疗器械、环境样品、水质、农产品、海产品、家禽家畜产品、食用菌、茶叶、粮食及副产品、水果蔬菜、调味品、烟草及制品、化工原料、纺织品、木材等进行Zui小抑菌浓度的检测。
测定方法
1)实验原理
抗生素在体外体系内能够对细菌的生长起到一定的抑制生长的作用。
2)实验准备
1、菌株:标准菌株或临床分离菌株。
2、药物及培养基:两种抗菌药(注明来源及含量)、MH肉汤培养基和LB营养琼脂等。
3、器材:96孔细胞培养板、1ml和200μL移液枪、1ml和200μL枪头、10ml刻度吸管、洗耳球、小试管、锥形瓶、容量瓶、小药瓶加塞、试管架、平皿、接种棒、酒精灯、分析天平、自动高压灭菌锅、超净工作台和37℃恒温箱等。
3)抑菌浓度测定
(1)在96孔培养板的前3排(即A、B、C3排)每孔中各加入含TTC(5%)的空白肉汤100μL。
(2)在A、B、C3排的第1孔加配好的药液(浓度为512IU/ml或μg/ml)100μL,对药物进行二倍稀释,即第1孔中加入药液后用移液枪充分吹打(至少3次以上)使药物与肉汤充分混匀,吸取100μL加入第2孔,再充分吹打使之与肉汤充分混匀,同样吸取100/μL加入第3孔中,照此重复直至Zui后一孔,吸取100μL弃去;此时每孔药物浓度从左到右依次为256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125IU/ml(或ug/ml)。
(3)再在每一孔中加入稀释好的菌液100μL,这样就形成测定一个药物MIC值的3次重复(A、B、C3排样品)。此时每孔药物浓度即Zui终药物浓度,从左到右依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0、0.5、0.25、0.125、0.06IU/ml(或μg/ml)。
(4)在同一块板上做一排阴性对照(仅加空白肉汤不加菌液)和一排阳性对照(加菌液肉汤不加药液)。
(5)将96孔培养板放入37℃恒温培养箱培养16~20h后,观察结果。
检测标准
1、BS ISO 10932:2010牛奶和乳制品.适用于双歧杆菌和非肠球菌乳酸菌(LAB)抗生素的Zui小抑菌浓度(MIC)的测定
2、DIN 58940-4:2002医疗微生物学.病源细菌对杀菌剂敏感性的检测.第4部分:Zui小抑制浓度的评价等级
3、ISO 10932:2010牛奶和乳制品.适用于双歧杆菌和非肠球菌乳酸菌(LAB)的抗生素Zui低抑菌浓度(MIC)测定
4、GSO ISO 10932:2021 乳及乳制品适用于双歧杆菌和非肠球菌乳酸菌(LAB)的抗生素Zui低抑菌浓度(MIC)的测定
5、ISO 10932:2010|IDF 223:2010 牛奶和乳制品适用于双歧杆菌和非肠球菌乳酸菌(LAB)的抗生素Zui低抑菌浓度(MIC)测定
6、BH GSO ISO 10932:2022 乳及乳制品适用于双歧杆菌和非肠球菌乳酸菌(LAB)的抗生素Zui低抑菌浓度(MIC)的测定