基因毒性杂质分离鉴定，杂质合成表征检测

基因毒性杂质（GTI）是指化合物本身直接或间接损伤细胞DNA，产生基因突变或体内诱变，具有致癌可能或者倾向。潜在基因毒性的杂质（PotentialGenotoxic Impurity，PGI）从结构上看类似基因毒性杂质，有警示性，但未经实验证明的黄曲霉素类、亚硝胺化合物、甲基磺酸酯等化合物均为常见的基因毒性杂质，许多化疗药物也具有一定的基因毒性，它们的不良反应是由化疗药物对正常细胞的基因毒性所致，如顺铂、卡铂、氟尿嘧啶等。

关于基因毒性杂质，北京清析技术研究院可提供杂质分离鉴定，杂质合成表征检测，分析方法开发与验证检测，复杂体系样本的分离分析，微量组分的结构分析，微量组分的毒性等检测项目。北京清析技术研究院可对莫西沙星，氯乙烷，叠氮类化合物，对氯苯乙酰胺，硝基苯酚，双氰胺，香豆素，制剂，卤代烃，化学药等进行基因毒性杂质的检测。

检测方法

1、UPLC/UV（超高效液相色谱/ 紫外检测器）

相同的化合物，使用UPLC代替HPLC，不仅检测速度增加，灵敏度也会提升好几倍，使用UPLC/UV对常规限度较高的基因毒性杂质都会有较好的效果。

如使用UPLC/UV方法检测苯磺酸氨氯地平样品中的苯磺酸甲酯（MBS）和苯磺酸乙酯（EBS），在苯磺酸氨氯地平样品中加标15 ppmMBS和EBS六次进样的叠加谱图。

可看出，对这一特定样品，UPLC/UV检测即可达到FDA和EMEA对MBS和EBS 的检测水平要求。

当然，与UPLC相连的检测器也不局限于UV，根据化合物特性，如待检测杂质有荧光发色基团，则可使用荧光检测器与超高效液相连接，得到较好的灵敏度。

2、2D UPLC/UV（二维超高效液相色谱/ 紫外检测器）

2DUPLC系统由两个溶剂管理器、一个样品管理器、一个色谱柱管理器和检测器共同组成。它的应用广泛，在药物领域中，常用到的即为增加分离度、增加灵敏度的功能。

使用UPLC二维技术，可以通过增大进样量的方式来提高灵敏度。使检测限在UPLC/UV的基础上提升。

在一维体系中，大体积进样，并将目标杂质和API有基本的分离，将目标杂质（下图中绿色部分）切入二维分离，得到无干扰的目标杂质峰，进行定量更准确。从下图的定量检测结果可看出，在5ppm的较低含量下，也有较好的回收率。

检测标准

1、ISO 21427-1:2006水质.测量感应微核评估基因毒性.第1部分:利用两栖生物幼虫评估基因毒性

2、NF T90-335-1*NF ISO 21427-1:2006 水质测量感应微核评估基因毒性 第1部分：利用两栖生物幼虫评估基因毒性

3、KS I ISO 21427-1:2009水质.测量感应微核评估基因毒性.第1部分:利用两栖生物幼虫评估基因毒性

4、KS I ISO 13829-2006(2016 水质 -使用Umu测试测定水和废水的基因毒性