MTT一般指噻唑蓝。是一种有机化合物,分子式是C18H16BrN5S,分子量为414.32。为黄色或橙黄色粉末,熔点:195℃(分解)。微溶于甲醇中,但难溶于水或乙醇中。用醚、丙酮或乙酸乙酯也不能将其完全溶解。溶于DMSO中。常配制成5mg/ml的储备液。
用途
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2.细胞增殖及细胞活性测定。
检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值),来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。
关于MTT,北京清析技术研究院可提供MTT细胞毒性试验,MTT药物敏感试验,MTT法体外药敏试验,MTT膳食耐量试验,MTT增殖试验,免疫MTT试验,MTT地塞米松抑制试验等检测项目。同时,北京清析技术研究院可对巨噬细胞,淋巴细胞,悬浮细胞,贴壁细胞等进行MTT检测。
MTT法
MTT法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT为黄色化合物,是一种接受氢离子的染料,可作用于活细胞线粒体中的呼吸链,在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下,外源性MT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MT结晶形成的量与活细胞数成正比。
通常,此法中的MTT浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器用铝箔纸包住。
检测标准
1、HG/T 5463-2018 硫化促进剂3-甲基四氢噻唑-2-硫酮(MTT)
2、YY/T 0993-2015 医疗器械生物学评价纳米材料:体外细胞毒性试验(MTT试验和LDH试验)