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琼脂糖水平电泳槽

琼脂糖水平电泳槽实验操作

以下内容由北京龙方科技为您提供！龙方电泳  伴您成功！

1. 根据电泳需要，Western blot公司，配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。一般为  1×TAE或0.5×TBE。

注意：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。

2. 根据制胶量及凝胶浓度，在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中，加入准确称量的琼脂糖粉。

注意：总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。

3. 在微波炉中加热溶解琼脂糖

注意：必须保证琼脂糖充分完全溶解，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

4.使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入EB溶液使其终浓度为0.5ug/ml，并充分混匀（EB为危险品，不提倡使用）。

注意：EB是一种致癌物质。使用含有EB的溶液时，请戴用手套。EB在可见光下会分解。

5.将琼脂糖溶液倒入制胶托盘中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在5－8 mm 之间。

注意：不要产生气泡，溶液温度太高(>60℃)，会使得水分

过分蒸发，改变凝胶离子浓度，影响电泳效果。

6.在室温下使胶凝固（大约30 分钟），放置于电泳槽中进行电泳。

注意：凝胶不立用时，用保鲜膜将凝胶包好在4℃下保存，或者放在制胶的缓冲液中，Western blot，一般可保存2～5天。

蛋白电泳

蛋白电泳样品的浓缩效应

1：凝胶孔径的不连续性：

 浓缩胶为大孔胶；分离胶为小孔胶。在电场作用下，样品颗粒在

 大孔胶中泳动的阻力小，移动速度快；当进入小孔胶时，受到的阻

 力大，Western blot报价，移动速度减慢。在两层凝胶交界处，样品迁移受阻而压

 缩成很窄的区带。

2： 电位梯度的不连续性：

  电泳开始后，快离子的快速移动会在其后形成一个离子强度很低  的低电导区，使局部电位梯度增加，Western blot批发，将蛋白质浓缩成狭窄的区带

大多数蛋白质在pH6.7或8.3时均带负电荷，在电场中，都向正极移动。

以上内容由北京龙方科技为您提供，希望对朋友们有所帮助！

电泳槽简介

龙方科技——生命科学实验室专用的电泳槽供应商，我们为您带来以下信息.

电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分，生命科学电泳实验技术的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据蛋白电泳的原理，凝胶都是放在两个缓冲腔之间，电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之间的接触可以是直接的液体接触，也可以间接通过凝胶条或滤纸条。垂直蛋白电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场，但在装置设计上有一些困难，如液体泄漏，用电安全和操作麻烦等问题.

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