蛋白的等电点与其氨基酸序列和三维结构密切相关，特定蛋白的等电点是固定的，可以通过比较不同蛋白质的等电点来研究它们的结构和功能差异，jīngquè测定等电点是生物制品电荷异质性表征的重要一环。
基于毛细管等电聚焦（cIEF）原理进行蛋白等电点分析是生物制品等电点检测中zuì常使用的方法。该微分离技术的基本原理是在毛细管两端加上直流电压，管内的载体两性电解质可以形成一定范围的pH梯度，蛋白质依据其所带电荷向阳极或阴极移动，直到净电荷为0的某个pH值（即等电点pI）时停止，zuì终蛋白质聚焦成很窄的区段，从而达到分离的目的，并获得该蛋白质的等电点信息。基于cIEF进行蛋白等电点检测，分析时间短、分辨率高、重复性好、jīngquè度高、样本用量少，已经成为多种氨基酸、多肽、重组蛋白、抗体及疫苗等生物制品研发与质量控制中的关键技术之一。
百泰派克生物科技BTP通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证；公司参照《中华人民共和国药典》2020年版三部通则0542/四部通则0542毛细管电泳法，根据cIEF原理，建立了针对于不同类别生物制品的蛋白等电点检测平台，可实现蛋白、抗体、疫苗、多肽、重组胶原蛋白等生物制品等电点的jīngquè测定，也可以提供完整的包含方法学建立、验证以及后续样品检测的整体服务。BTP还提供其他生物制品表征相关的服务，可点击了解详情。
实验仪器
BECKMAN COULTER PA800+毛细管电泳仪
技术应用
cIEF具有分析时间短，分辨率高、重复性好、jīngquè度高、样本用量少等优点。该方法已经成为多种氨基酸、多肽、重组蛋白、抗体、疫苗等生物制品研发与质量控制中的关键技术之一。
案例示意
实验过程中，将样品与两性电解质及5种标准的pIMarker混合，使用毛细管电泳仪检测，在毛细管中电泳聚焦，根据5种内标的保留时间，计算出供试品等电点。
图1 pI marker结果
图2 单抗样品检测结果
常见问答
问题1：为什么多数蛋白质的等电点是中性偏酸性？
回答：蛋白质是由氨基酸组成的，而大多数氨基酸等电点小于人体的pH（pH=7.4），故而大多数的蛋白质的等电点偏酸性，如山羊胃蛋白酶等电点约为3。
问题2：有没有等电点偏碱性的蛋白质？
回答：存在pI碱性的蛋白质。当蛋白质中的碱性氨基酸，如组氨酸，精氨酸、赖氨酸、比列较大，会导致等电点偏碱性，如鱼精蛋白等电点约为12。
问题3：做等电点检测，两种检测方法如何选择？
回答：基于cIEF的等电点检测需要样品具有280nm的紫外吸收；不具有280nm的紫外吸收的样品（例如胶原蛋白）进行基于IEF的等电点检测。
基于cIEF的蛋白等电点分析一站式服务
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相关服务
蛋白质等电点测定
基于IEF的蛋白等电点分析
其他服务项目
优质检测平台
（1）基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台
该平台配备了Agilent 2100生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统，为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航，包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:
（2）基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台
该平台配备了超高效液相色谱质谱联用，Orbitrap Fusion Lumos Tribri,Thermo ScientificExploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段，包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;
（3）生物药物表征平台
该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪，氢气交换质谱仪配备机械臂，为生物药物表征提供了全面的分析手段，包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:
（4）基于10x Genomics的单细胞分析平台
该平台能够完成基于10xGenomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;
（5）基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台
采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry Systemfor Single CellAnalysis)用于单细胞质谱分析，该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;
（6）基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台
基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台，能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;
（7）生信云平台
基于生物信息分析方法的生信云平台，能够完成一整套的生物信息学解决方案，包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。
百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
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