弧菌(Vibrio)是菌体短小,弯曲成弧形,尾部带一鞭毛的革兰氏阴性菌。如霍乱弧菌。弧菌属(Vibrio)广泛分布于河口、海湾、近岸海域的海水和海洋动物体内。弧菌有91种。主要鱼贝类致菌为:溶藻弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、创伤弧菌等;有些弧菌也能引起人类疾病如:溶藻弧菌、创伤弧菌等。关于溶藻弧菌,北京清析技术研究院可提供间接荧光抗体测定,PCR测定,病原性测定,免疫特性测定,ELISA测定等检测项目。
检测方法
溶藻弧菌的检测方法主要包括以下几种:
1、实时荧光PCR法
这种方法适用于检测海产品中的溶藻弧菌,具有检测特异性好、灵敏度高的特点。
2、分离培养法
首先需要收集样本,如无菌采集新鲜粪便标本,然后进行分离培养。粪便标本可以直接划线接种于TCBS和弧菌显色培养基,或者进行增菌分离培养,加入到3%氯化钠碱性蛋白胨水中进行增菌培养。
3、宿主菌和噬菌体分离培养法
首先需要分离纯化宿主菌,如从南美白对虾的病虾肠道中分离获得溶藻弧菌,然后在LB液体培养基中扩大培养。接着需要分离噬菌体,并在宿主菌培养液中进行扩培。之后,通过点滴法结合噬菌体混合液和弧菌的培养,观察有无噬菌斑出现,以此来鉴定溶藻弧菌。
以上方法均可用于检测溶藻弧菌,具体选择哪种方法取决于检测的目的和条件。
检测标准
1、DB44/T 445-2007 水产品中溶藻弧菌检验方法
2、SN/T 5364.3-2021 出口食品中致病菌检测方法微滴式数字PCR法 第3部分:溶藻弧菌
3、SN/T 2754.12-2011出口食品中致病菌环介导恒温扩增(LAMP)检测方法 第12部分:溶藻弧菌
4、SN/T 5228.1-2019 出口食品中病原微生物快速筛选方法MALDI-TOF MS法 第1部分:溶藻弧菌
5、SN/T 5125-2019水生动物副溶血弧菌和霍乱弧菌双重实时荧光检测方法