荧光光谱法(又称荧光分析法或分光荧光测定)是一种电磁光谱法,可以测量样品吸收光子后发出的光子强度。实际上,大多数荧光分子是芳香族的,如蛋白质/肽中的色氨酸。光学技术,如UV-Vis、圆二色谱(CD)、傅立叶变换红外(FTIR)和荧光光谱,都被用于获取被测化合物的结构、相互作用和动力学信息。荧光光谱是研究溶液状态和显微镜下蛋白质/肽的实时结构和动力学的重要研究工具。
荧光光谱分析
生物制药,特别是蛋白质和多肽类药物,在整个研发过程中都面临着独特的挑战。在成功批准和上市之前,需要对治疗性蛋白质/肽的生物物理、生化特性和3D结构有透彻的了解,因为产品的活性、稳定性、毒性、功效和保质期会因结构-活性关系而受到影响。与小分子不同,这些大分子需要多种分析方法结合进行分析。荧光光谱法可应用于:1,通过改变荧光强度来探测结构变化或两个分子的结合;2,通过色氨酸荧光的波长定位色氨酸残基(在蛋白质表面或深埋在蛋白质内部);3,通过荧光偏振和各向异性研究荧光团迁移率。
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