HILIC-UHPLC分析N-聚糖键

糖苷键很少对糖蛋白的功能产生影响，通常不需要确定。糖蛋白的聚糖结构高度复杂，评估N-糖的糖苷键的构型和位置对分析糖蛋白的结构是有帮助的。已知有五种常见的N-聚糖键，Z_U_I常见的是N-乙酰氨基葡糖与天冬酰胺（GlcNAcβ1-Asn）连接。与Asn连接的其他类型包括：哺乳动物和古生菌的层粘连蛋白中的葡萄糖，古生菌中的N-乙酰半乳糖胺（GalNAc），鼠李糖素细菌。也有报告显示，葡萄糖在甜玉米中与精氨酸连接。

HILIC-UHPLC分析N-聚糖键

N-聚糖通过N-糖苷酶F（Peptide N Glycosidase F，PNGase F）反应从糖蛋白中水解出来。水解的N-聚糖用2-氨基苯甲酰胺（2-AB）标记，用多种外切糖苷酶消化。Z_U_I后，通过亲水相互作用色谱法（HILIC）结合荧光和质谱检测对聚糖进行分析。

N-聚糖键分析一般步骤

1-. 样品制备

2. N聚糖水解

3. 2-AB标记和标记的聚糖与一系列外切糖苷酶顺序反应

4. 基于UPLC-HILIC-FLD的分析

5. 可以通过MS/MS片段确定详细的聚糖结构

内切糖苷酶的作用：

内切糖苷酶能从糖蛋白或糖脂中水解寡糖。通常它不会从结合的蛋白质和脂质分子中水解寡糖。内切糖苷酶通过破坏聚合物中两个糖单体之间的糖苷键起作用。

内切糖苷酶H：水解低聚甘露糖和杂合N-聚糖

内切糖苷酶F：水解简单的二价N-聚糖

百泰派克生物科技-您身边的生物质谱专家
北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd. 简称BTP）从事以生物质谱为依托的生物药物表征，大分子物质（包括蛋白质、多肽、代谢物）质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务，业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台，服务3000+企业，10000+客户的选择，致力于为您提供y_ō_u|z_h_ì的生物质谱分析服务!