免疫共沉淀(Co-IP)与免疫沉淀(IP)技术服务有什么区别?原理是什么?
更新:2023-02-01 17:56 编号:18020818 发布IP:36.112.91.50 浏览:47次- 发布企业
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详细介绍
免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法,主要是用于抗原或抗体的定性检测,以及纯化目的蛋白质的常规方法。
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档,已成为研究蛋白质相互作用的经典方法。
不难看出,免疫共沉淀与免疫沉淀技术所使用的原理与方法大致相似,所不同的是,在免疫共沉淀中,对靶蛋白的结合与沉淀由另一个与之发生相互作用的蛋白替代。
免疫沉淀的应用场景
(1)免疫沉淀(IP)一般可用于以下的研究分析
1.磷酸化位点分析
2.激酶活性分析
3.乙酰化位点发现与鉴定
免疫共沉淀的应用场景
(2)免疫共沉淀(Co-IP)一般可用于以下的研究分析
1.利用质谱鉴定相互作用蛋白
2.蛋白相互作用的验证
3.缺失分析联合co-IP进行蛋白互作结构域分析
4.测定两种目标蛋白质是否在体内结合
5.确定一种特定蛋白质的新的作用搭档
6.分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物
免疫沉淀(IP)实验相关技术知识介绍(原理、方法、步骤及常见问题和注意事项)(点击了解更多:免疫共沉淀(Co-IP)/免疫沉淀(IP)服务:https://cn.sinobiological.com/services/ip-co-ip-service)
免疫沉淀是基于传统亲和纯化方法开发的,在含有目的抗原的细胞裂解液中加入特定的抗体以及Protein A-Beads(预先将Protein A固定结合在磁珠上),根据抗原与抗体、Protein A与抗体的FC的特异性,形成“抗原-抗体-ProteinA-Beads”复合物,清洗离心后去除溶液中未结合的杂蛋白,检测是否存在目的蛋白。与传统的柱式亲和纯化相比,免疫沉淀的目标是仅分离足够用于WesternBlot或其他检测方法检测的蛋白质。通常可以将已处理和未处理的样品进行比较,从而评估目标蛋白的相对量。
实验方法:
该实验的方法很简单,可以概括为以下几步:
Step1: 蛋白样品准备,细胞需提前裂解
Step2: 加样,抗原抗体结合,protein A 琼脂磁珠与抗体结合
Step3: 免疫沉淀分离
Step4: 洗脱蛋白复合物
Step5:分析检测—Western Blot或者质谱
法定代表人 | 张杰 | ||
注册资本 | 12920 | ||
主营产品 | 生物试剂 | ||
经营范围 | 生物技术研发服务;技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让、技术培训(不得面向全国招生);生产生物制品;销售生物制品(仅限分支机构经营);货物进出口、代理进出口、技术进出口。(市场主体依法自主选择经营项目,开展经营活动;依法须经批准的项目,经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动;不得从事国家和本市产业政策禁止和限制类项目的经营活动。) | ||
公司简介 | 北京义翘神州科技股份有限公司是一家从事生物试剂研发、生产、销售并提供技术服务的生物科技公司。所有产品都是自主研发和生产的,主要业务包括重组蛋白、抗体、基因和培养基等产品,以及重组蛋白、抗体的开发和生物分析检测等服务,同时也为制药公司或生物技术公司提供单克隆抗体候选药物的临床前规模生产服务。义翘神州的产品能够覆盖生命科学研究的多个领域,为分子生物学、细胞生物学、免疫学、发育生物学、干细胞研究等基础科 ... |
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