抗体人源化改造技术分享——义翘抗体人源化服务介绍

单克隆抗体是由单个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体。经过40多年的研究和发展，单克隆抗体药物已在肿瘤和自身免疫疾病治疗领域取得巨大进展，在医药领域具有广泛的发展前景。

2021年，国家药监局药品审评中心（CDE）共受理抗体药物申请1053件，几乎比2020年增加看一倍。目前，FDA已批准108款抗体药物上市，今年1月份批准用于动物的抗体新药。单克隆抗体药物市场发展迅猛，预计2023年全球抗体药物将突破2300亿美元，将会占到全球生物制品市场的50%以上。

自1986年个鼠源单克隆抗体药物OKT3上市以来，治疗性抗体得到了迅速的发展，截止2021年底，FDA共批准了超过100款抗体药物，每年批准的抗体药物约占据批准新药的五分之一，已成为现代生物医药的重要组成部分。治疗性抗体经历了鼠源性抗体、嵌合抗体、改性抗体和表面重塑抗体（部分人源化抗体）以及全人源化抗体等不同发展阶段。

与之同步，抗体开发技术和平台也在不断的更新换代。

当前比较常见的抗体开发路线主要有杂交瘤、抗体库和单个B细胞。其中杂交瘤技术和抗体库技术应用较早，单个B细胞技术起步略晚，相对新兴。

杂交瘤技术是将具有分泌特异性抗体的致敏B细胞与具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合，制备B细胞杂交瘤。杂交瘤技术已发展成为一种成熟的生产单克隆抗体的方法，广泛用于多种抗体开发。但由于鼠抗体会在人体引起人抗鼠免疫反应，需要对抗体技术进行改进，比如重组抗体技术。

抗体库技术的发展使重组抗体技术制备更简单。比如噬菌体展示技术不再需要细胞融合，甚至不需要动物免疫，可以利用抗原直接从库中筛选进行抗体开发。

单个B细胞抗体技术作为新一代抗体开发技术，可以从单个B细胞中高效、快速的分离抗体。随着流式细胞、微流控及光导等相关生物技术的发展，单个B细胞技术已走向更广泛的商业应用。

义翘神州已构建杂交瘤、噬菌体展示及单个B细胞等多个单克隆抗体开发路线，并建立纳米抗体开发、Beacon光导平台等抗体制备技术，可以根据靶点特性或客户需求选择技术路线进行抗体开发。可针对抗独特型抗体、抑制剂、激动剂、内化抗体等不同类型的检测和治疗型抗体进行抗体开发和改造。义翘神州已成功交付数万计的抗体项目，客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他相关生物技术企业等。

义翘神州抗体人源化服务介绍：

鼠源抗体对人而言有较强的免疫反应，会产生人抗鼠抗体反应（Human anti-mouse antibody response,HAMAresponse），影响鼠源单抗在临床上应用的安全性及治疗效果。抗体人源化通过基因改造，使鼠源抗体具有与人体内抗体类似的结构，从而逃避免疫系统的识别，避免诱导HAMA反应。义翘神州利用CDR置换技术及计算机辅助结构模拟设计可对鼠源单抗等进行人源化改造，保证人源化程度>95%，为客户提供优质的单克隆抗体人源化服务。

抗体人源化服务内容：

①亲和力确认：鼠源抗体与抗原亲和力确认

②人鼠嵌合抗体制备：

利用HEK293细胞瞬时表达并纯化、嵌合抗体与抗原蛋白亲和力测定

③人源化突变体制备：

抗体3D结构建模、回复突变、载体构建及质粒制备、瞬时转染HEK293细胞并纯化、SDS-PAGE及UV分析、亲和力测定：利用ELISA法及Biacore或Octet测定亲和力

④交付内容

 3株亲和力好的纯化人源化抗体，每株0.2~0.5mg（其中至少1株人源化抗体亲和力与亲本非人源抗体亲和力基本一致）

抗体序列

分别含有抗体重链、轻链的商业表达载体

质量检验报告 (CoA）

剩余抗原蛋白 PTM和聚集性预测报告（可选）