在定量蛋白质组学研究中,LFQ(uantification) 与 iBAQ(intensity-Baseduantification) 是两种常见但本质不同的定量策略。两者虽都基于 DDA(Data-Dependent Acquisition)质谱数据,但在定量目标、算法逻辑、结果解读等方面存在显著差异。理解它们的区别,有助于研究者根据项目需求选择合适的定量方案。
一、基本原理解析:LFQ vs. iBAQ
1、LFQ(uantification)
LFQ 是一种相对定量方法,用于比较多个样本中同一蛋白的丰度变化。其核心依据是:将蛋白质的肽段在不同样本中的 MS1 强度(通常是峰面积)进行归一化比对,从而推断表达差异。
(1)核心逻辑:关注同一蛋白在不同生物样本中的变化趋势
(2)输出结果:每个蛋白在不同样本中的归一化丰度值(无单位)
(3)关键特征:
不需要标记试剂,操作简便
适合大规模样本比较,如多组学条件筛选
对统计设计和数据质量要求较高
2、iBAQ(Intensity-Baseduantification)
iBAQ 属于一种准juéduì定量方法,用于估算不同蛋白之间的丰度比例。其计算方法是将一个蛋白质的所有鉴定肽段的 MS1 强度求和,并除以该蛋白理论可生成的肽段数。
(1)核心逻辑:反映样本中不同蛋白之间的摩尔浓度相对值
(2)输出结果:蛋白质相对摩尔丰度,可用于蛋白间定量比较
(3)关键特征:
考虑蛋白质长度与消化肽段数,有助于丰度校正
适合构建表达谱、模型建构、细胞组成推断等应用
更贴近“juéduì量”,但仍依赖质谱信号强度作为间接指标
二、核心区别一览表
| 比较维度 | LFQ | iBAQ |
|---|---|---|
| 定量类型 | 相对定量(样本间) | 准juéduì定量(蛋白间) |
| 比较目标 | 同一蛋白在不同样本中的丰度变化 | 不同蛋白在同一样本中的丰度比例 |
| 单位与数值意义 | 无单位(归一化值) | 近似摩尔浓度(相对值) |
| 是否考虑蛋白质长度 | 否 | 是(基于理论肽段数) |
| 适用场景 | 差异表达分析、处理组比较 | 蛋白组图谱构建、系统生物学建模 |
| 统计处理重点 | 样本间标准化、缺失值填补 | 蛋白内肽段强度汇总与标准化 |
| 软件支持 | MaxQuant(LFQ模块)等 | MaxQuant(开启iBAQ选项) |
| 输出解读方式 | 需结合生物学重复与统计显著性 | 可直接用于丰度比例排序和比例分析 |
三、LFQ vs. iBAQ:选择哪种方法?
如果研究目标是找出处理组 vs 对照组中差异表达的蛋白质,建议使用 LFQ,其在差异分析中表现更稳定。如果关注的是某个样本中各蛋白的丰度组成、功能比例、结构蛋白 vs 酶类蛋白的占比等信息,则 iBAQ 更具优势。这两种方法并不互相替代,而是服务于不同的科学问题。研究者可根据实验目的选择合适策略,必要时也可结合使用,以获取更全面的定量信息。
四、百泰派克生物科技的定量策略支持
在百泰派克生物科技,我们基于项目需求提供灵活的蛋白质组定量方案:
采用高分辨率质谱平台(如 Orbitrap Fusion Lumos)
支持 LFQ 与 iBAQ 双模式分析
提供全流程数据质控、统计分析与生物学解释支持
无论是机制研究、临床转化还是生物信息建模,我们都能为您提供高准确性、强可重复性的蛋白质组定量数据。
LFQ 关注的是组间变化,而 iBAQ 反映的是蛋白丰度结构。二者从定量维度、输出意义到适用场景均有不同。深入理解这些差异,有助于您更科学地设计实验并解读数据结果。如您有相关项目需求或技术咨询,欢迎联系百泰派克生物科技获取zhuānyè支持和一对一服务。
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| 成立日期 | 2015年12月23日 | ||
| 法定代表人 | 王素芹 | ||
| 注册资本 | 100 | ||
| 主营产品 | 蛋白组学,从头测序,生物制药分析,代谢组学 | ||
| 经营范围 | 技术开发、技术推广、技术转让、技术咨询、技术服务;货物进出口、技术进出口、代理进出口;销售机械设备、化工产品(不含危险化学品)。(依法须经批准的项目,经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动。 | ||
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