什么是共免疫沉淀 (Co‑IP)？

在蛋白质功能研究和信号通路解析的实验室日常中，共免疫沉淀（Co-immunoprecipitation, Co-IP） 几乎是每一位生命科学研究者都会接触到的重要技术。它不仅是验证蛋白质–蛋白质相互作用的“金标准”方法之一，还是连接免疫学与现代质谱组学的关键桥梁。

共免疫沉淀的基本原理

共免疫沉淀是一种基于抗体与目标蛋白（bait）特异性结合的免疫亲和富集技术。其核心目的是：通过识别某一目标蛋白，将与其相互作用的伴侣蛋白一并沉淀下来，从而间接捕捉蛋白复合物。与其他蛋白互作验证方法（如双杂交、FRET、BiFC）相比，Co-IP 的突出优势在于其在近生理条件下完成，zuì大程度地保留了蛋白质的天然构象与互作状态。

共免疫沉淀实验流程解析

1、细胞裂解

使用温和条件（如非离子型去垢剂 NP-40、Triton X-100）裂解细胞，尽量保持蛋白复合物的天然状态。

2、抗体结合

向裂解液中加入特异性抗体，使其与目标蛋白结合，形成抗体-抗原复合物。

3、蛋白A/G琼脂糖珠捕获

利用蛋白A或G包被的琼脂糖珠捕获抗体复合物。

4、洗涤与洗脱

洗去非特异性结合的杂质后，通过变性（如SDS-PAGE加载缓冲液）将蛋白复合物洗脱下来。

5、检测相互作用蛋白

常用Western blot检测是否共沉淀了其他相互作用蛋白，也可结合质谱进行未定义相互作用蛋白的筛选。

Co-IP与其他蛋白互作技术的对比

从实际应用来看，Co-IP依然是验证候选蛋白互作关系的“金标准”之一，尤其适合配合质谱实现大规模互作组学研究。

Co-IP结合质谱：探索未知蛋白互作网络

随着质谱技术的快速发展，越来越多研究将Co-IP与质谱联用（Co-IP-MS），用于系统解析蛋白质复合物的组成和动态变化。这一策略通常包括：

1、抗体免疫沉淀富集复合物

2、SDS-PAGE或in-solution酶解

3、高分辨率质谱（如Orbitrap）分析

4、生物信息学鉴定相互作用蛋白

在百泰派克生物科技，我们配备高灵敏度的Orbitrap Exploris 480及定制化的免疫富集流程，支持多种标记体系（FLAG、HA、Myc、GFP等），可助力客户开展高通量的蛋白互作图谱分析。

共免疫沉淀实验中的注意事项

Co-IP技术广泛应用，但其结果的可靠性很大程度上依赖实验设计与操作细节，常见影响因素包括：

1、抗体质量

高特异性和高亲和力的抗体是成功的关键。推荐使用验证过的商业抗体，或结合抗体预包被磁珠提升效率。

2、裂解条件

选择合适的裂解缓冲液（含适量盐浓度和非离子去垢剂），避免过强条件破坏蛋白互作。

3、非特异性结合控制

设置IgG对照、beads-only对照，有助于排除背景噪音。可考虑使用串联免疫沉淀（Re-IP）增强特异性。

4、内源蛋白 vs. 过表达系统

过表达系统更易获取信号，但也可能带来人工假互作。建议结合内源蛋白验证关键发现。

共免疫沉淀的应用场景

Co-IP在生命科学多个领域有广泛应用，包括但不限于：

1、信号通路解析（如EGFR、MAPK等互作蛋白筛选）

2、转录调控机制研究（如转录因子与共调节因子的结合）

3、疾病机制探索（如肿瘤相关蛋白互作网络）

4、药物靶点筛选与验证

对于希望系统性分析互作网络的客户，百泰派克生物科技提供从实验设计 → 样本处理 → Co-IP富集 → 质谱分析 → 生信解读的一站式服务，助力您深入挖掘分子机制、加速科研进展。

共免疫沉淀（Co-IP）作为研究蛋白互作的重要工具，凭借其操作简便、特异性强、结果可靠的特点，至今仍是实验室日常研究中bùkěhuòquē的方法。尤其是在与高分辨质谱联用后，Co-IP的研究深度与广度被极大拓展，成为连接分子机制研究与系统生物学探索的桥梁。如果您在蛋白互作验证或高通量互作组学研究中有实验需求，欢迎联系百泰派克生物科技，我们将为您的科研提供高效可靠的技术支持。

百泰派克生物科技特色项目

蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析，分析更系统准确。

单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标进行表征，百泰派克生物科技可做到检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

https://www.biotech-pack.com/index.html