基于质谱的HCP鉴定方法在抗体药物生产中的应用

随着生物制药技术的快速发展，单克隆抗体（monoclonal antibody, mAb）已成为zuì具商业价值的治疗性生物药之一。在其大规模生产过程中，宿主细胞蛋白（Host Cell Proteins, HCPs）作为过程相关杂质，是影响产品质量、安全性与一致性的关键因素。HCP主要来源于上游细胞培养所使用的表达系统（如CHO细胞），其在细胞裂解、纯化及灌装过程中可能部分残留至zuì终药品中。大多数HCP在体内无功能活性，但某些蛋白（如蛋白酶、信号转导蛋白、免疫原性分子）微量存在，也可能引发不良免疫反应、降解产品活性成分或干扰功能检测。监管机构均强调对HCP进行有效监测和控制，尤其在生物制品申报资料中要求提供HCP的定性与定量分析数据。检测手段如ELISA在中后期质量控制中应用广泛，但在成分识别、覆盖广度及方法灵活性等方面存在天然局限。而基于质谱的HCP鉴定方法因其高通量、高分辨率的特点，正日益成为HCP研究和工艺开发的重要工具，助力生物药质量评价向更高维度迈进。

ELISA方法的广泛应用与挑战

ELISA（酶联免疫吸附测定）作为当前HCP检测的主流方法，具有灵敏度高、操作简便、可高通量筛查的优势，尤其适用于工艺放行和稳定性测试阶段。其核心依赖抗HCP抗体作为检测基础，这也带来了几个关键限制：

1、抗体覆盖范围有限：无法识别未被抗体捕获的HCP；

2、不具备成分解析能力：仅提供总量信息，难以识别特定高风险HCP；

3、开发周期长，物种适配性差：不同细胞系需定制抗体库，增加方法开发成本。

在抗体药物的早期开发阶段，尤其是进行工艺比选、风险评估、残留追踪时，ELISA往往缺乏足够的分辨率与可追溯性。

基于质谱的HCP鉴定方法：优势与应用价值

1、蛋白组学视角，识别具体残留蛋白

质谱（Mass Spectrometry, MS）结合液相色谱（LC-MS/MS）技术，能够从整体蛋白组的角度，对复杂生物样品中的HCP进行全面、系统、分子层面的识别和定量。相比ELISA只能检测抗体能识别的部分，质谱方法几乎不设上限地解析蛋白种类及其丰度分布，尤其适用于高风险蛋白监测。

2、非依赖抗体，通用性更强

质谱技术不依赖特异性抗体，而是基于质荷比（m/z）与保留时间等物理参数，实现对HCP肽段的准确鉴定。这种无偏见的检测方式适用于任意宿主系统（CHO、HEK293、E. coli等），提高了方法的可复用性和开发效率。

3、结合工艺开发，实现jīngzhǔn调控

通过比较不同工艺步骤或不同纯化策略下的HCP残留谱图，研究者可深入分析某些HCP的来源与变化趋势，从而对关键步骤（如Protein A洗脱、阴离子交换、超滤浓缩）进行数据驱动的优化调整。质谱数据可辅助建立特征性HCP指标库，用于工艺一致性与残留趋势的长期监控。

面对日益严格的生物药监管要求和日趋复杂的抗体分子结构，一般HCP检测手段已难以全面满足药物研发全生命周期的质量监控需求。基于质谱的HCP鉴定方法，凭借其高分辨率、高通量、无抗体依赖的独特优势，正在成为抗体药物生产中bùkěhuòquē的分析工具。未来，HCP的监控策略将从总量控制迈向成分jīngzhǔn管理，而基于质谱的HCP鉴定方法无疑将在这一转变中扮演核心角色。对于生物制药企业而言，拥抱先进的质谱平台，不仅有助于优化工艺、提升产品一致性，更是保障药品质量与申报成功率的重要保障。百泰派克生物科技将持续输出蛋白组学、质谱分析与生物药开发前沿洞察，为您的科研和产业应用保驾护航。

百泰派克生物科技特色项目

蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析，分析更系统准确。

单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标进行表征，百泰派克生物科技可做到检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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