互作蛋白质谱鉴定是一种利用质谱技术研究蛋白质相互作用的方法,其通过免疫(共)沉淀、亲和纯化等方法分离目标蛋白质复合物;再利用蛋白质酶消化产生肽段,使用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)分析肽段;zuì后,基于质谱数据,结合生物信息学工具,鉴定和定量互作蛋白。互作蛋白质谱鉴定可以鉴定或验证相互作用的蛋白质,发现与目标蛋白相互作用的新蛋白,鉴定和定量互作蛋白,并揭示生物体内蛋白质信号传导通路,助力药物靶点发现和生物标志物研究,为药物开发提供依据。
百泰派克生物科技BTP基于Thermo Fisher的Orbitrap Exploris240质谱平台结合Nano-LC的一站式互作蛋白质谱鉴定服务,可对IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物的质谱鉴定分析,蛋白质样品的鉴定前处理过程严格按照NatureMethods发表的文章:Universal sample preparation method for proteomeanalysis进行,保证鉴定试验中得到更高的肽段覆盖率。
百泰派克生物科技BTP互作蛋白质谱鉴定流程
1.蛋白质提取:
采用zuì佳的方法从细胞或组织样本中提取蛋白质,并测定蛋白质纯度和浓度,确保提取物的质量。
2.互作蛋白获取:
根据实验需求利用免疫(共)沉淀、(GST)Pull-down或免疫印迹方法,富集目标蛋白质及其互作蛋白。
3.洗脱和富集:
将目标蛋白质复合物从结合介质上洗脱、富集并收集蛋白质样品以便进行下一步的质谱分析。
4.蛋白质酶解:
将洗脱后的互作蛋白质组样品用多种蛋白酶(如胰蛋白酶)进行酶解,生成肽段。
6.肽段分离与纯化:
利用高效液相色谱(HPLC)或反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术对酶解后的肽段进行分离和纯化 。
7.质谱分析:
通过液质联用(LC-MS/MS)对肽段进行质谱分析,获得质谱数据。
8.数据处理与分析:
对质谱数据进行数据库搜索、生物信息学分析,定性定量鉴定互作蛋白质。
我们的优势
1.高灵敏度与高准确度:
我们的质谱技术能够在复杂的生物样品中准确的检测到互作蛋白质,即使是低丰度的互作蛋白质也可以被鉴定,具有很高的灵敏度。
2.高通量:
质谱技术能够在短时间内鉴定和定量大量的蛋白质,为研究者节省时间和实验成本。
3.多样的蛋白质互作类型:
我们的服务涵盖多种蛋白质互作类型,包括同源互作、异源互作、瞬时互作和yǒngjiǔ性互作等。
4.相对无偏倚性:
相比传统的基因芯片和酵母双杂交等技术,质谱技术在检测蛋白质互作时具有相对较低的偏倚性。
5.多适用性:
质谱技术可以应用于各种生物体系,如细菌、酵母、植物、动物和人类,为多种生物领域的研究提供支持。
6.结构信息丰富:
质谱技术可以提供蛋白质的翻译后修饰、剪切、蛋白-蛋白互作等多方面的结构信息,帮助研究者深入了解蛋白质功能和调控机制。
关于样品
1.总蛋白质提取物:可以从细胞、组织或生物体中提取。建议提供至少100 µg的蛋白质以确保实验成功。
2.富集蛋白质:对于特定目标蛋白质的互作蛋白质鉴定,您可以提供经IP、Co-IP样品及GST融合蛋白Pull-down等纯化样本中的蛋白/蛋白混合物。建议至少提供50 ug富集蛋白质。
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 互作蛋白质谱鉴定详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
互作蛋白质谱鉴定一站式服务
您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
相关服务
Pull-down靶蛋白质谱鉴定
蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质鉴定
蛋白质相互作用质谱分析
免疫共沉淀法(CO-IP)结合质谱联用的蛋白互作分析
GST融合蛋白Pull-down技术结合质谱联用的蛋白互作分析
SILAC与免疫共沉淀结合质谱联用的蛋白互作分析
蛋白质相互作用分析
蛋白质质谱鉴定
其他服务项目
优质检测平台
(1)基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台
该平台配备了Agilent 2100生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统,为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航,包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:
(2)基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台
该平台配备了超高效液相色谱质谱联用,Orbitrap Fusion LumosTribri,Thermo ScientificExploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段,包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;
(3)生物药物表征平台
该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪,氢气交换质谱仪配备机械臂,为生物药物表征提供了全面的分析手段,包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:
(4)基于10x Genomics的单细胞分析平台
该平台能够完成基于10xGenomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;
(5)基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台
采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass CytometrySystemfor Single CellAnalysis)用于单细胞质谱分析,该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;
(6)基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台
基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台,能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;
(7)生信云平台
基于生物信息分析方法的生信云平台,能够完成一整套的生物信息学解决方案,包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。
1.公司采用ISO9001质量控制体系,提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
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