mRNA一般是指信使核糖核酸,是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。以细胞中基因为模板,依据碱基互补配对原则转录生成信使核糖核酸后,信使核糖核酸就含有与DNA分子中某些功能片段相对应的碱基序列,作为蛋白质生物合成的直接模板。信使核糖核酸只占细胞总RNA的2%~5%,但种类多,并且代谢十分活跃,是半衰期短的一种RNA,合成后数分钟至数小时即被分解。信使核糖核酸起着传递遗传信息的作用,能够指导细胞生产胞内蛋白、膜蛋白及胞外蛋白。
检测方法
1、RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)
这是一种常用的方法,通过将mRNA反转录成cDNA,进行PCR扩增,并使用荧光探针或染料检测目标mRNA的存在与否。
2、Northernblotting(北方杂交)
这种方法通过将RNA迁移至固定在膜上的DNA探针上,使用放射性探针或荧光标记的探针检测目标mRNA的存在及其大小。
3、Insituhybridization(原位杂交)
利用与目标mRNA互补的DNA或RNA探针,在组织切片中直接检测mRNA分布。
4、RNA-Seq
这是新的一种方法,通过高通量测序技术直接测定mRNA序列和表达水平,可以提供全基因组范围内的mRNA信息。
检测标准
1、T/CAB 0106-2021 合成mRNA质量要求
2、T/CAB 0205-2022 脂质纳米颗粒包封mRNA无菌制剂
3、AWWA WQTC56953 利用 mRNA RT-PCR检测细胞培养中的传染性腺病毒