详细介绍
转化是将外源 DNA分子导入到受体细胞,使之获得新的遗传特性的一种方法。转化所用的受体细胞一般是限制 -修饰系统缺陷变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶( R- , M-)。将对数生长期的细菌(受体细胞)经理化方法处理后,细胞膜、的通透性发生暂时性改变,成为能允许外源 DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的 DNA分子通过复制和表达实现信息的转移,使受体细胞具有了新的遗传性状。将经过转化的细胞在筛选培养基上培养,即可筛选出转化子(带有异源 DNA分子的细胞)。
关于质粒DNA转化实验，北京清析技术研究院可提供质粒DNA转化实验等检测项目。北京清析技术研究院可对细菌质粒，重组质粒，耐药质粒，大肠杆菌质粒，载体质粒，灰色链霉菌，嗜热脂肪芽孢杆菌质粒，假结核耶氏菌等进行质粒DNA转化实验。
实验步骤
1、准备质粒DNA
从宿主细胞中提取含有所需质粒的DNA，并通过酶切或PCR扩增等方法纯化目标质粒DNA。
2、制备目标细胞
选择目标宿主细胞，并通过培养培养基中生长至合适的阶段。
3、转化DNA
制备化学转化物质(如钙化剂或聚乙二醇)，并将宿主细胞与质粒DNA和转化物质混合。此时，转化处理会造成细胞膜需要对质粒DNA进行内向转运，从而实现外源质粒DNA的导入。
4、分离新生细胞
将混合物培养于适当的条件下，以促进新生细胞的发育。在此过程中，只有有效转化的细胞才会表现出质粒DNA所含有的突变表型，例如抗生素耐药性。
5、筛选克隆
将分离的新生细胞在含有选择性抗生素的培养基上进行生长筛选。只有成功转化并集成了质粒DNA的细胞才会继续生长下去。
6、检测质粒DNA
将确认保存的克隆菌种进行DNA提取，并通过某种检测方法来确认实验成功。例如，可以通过PCR扩增、限制内切酶切割或者基于测序技术等方法来检测质粒DNA。
检测标准
1、T/SHSYCXH 10-2022 质粒DNA超螺旋构象的检测毛细管凝胶电泳法
| 成立日期 | 2016年06月17日 | ||
| 主营产品 | 气体检测,配方分析,失效分析,中药成分检测,油墨成分分析 | ||
| 经营范围 | 工程和技术研究与试验发展；医学研究与试验发展；自然科学研究与试验发展；农业科学研究与试验发展；技术推广、技术开发、技术咨询、技术服务、技术转让；技术检测。（市场主体依法自主选择经营项目，开展经营活动；依法须经批准的项目，经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动；不得从事国家和本市产业政策禁止和限制类项目的经营活动。） | ||
| 公司简介 | 北京清析技术研究院是由来自知名高校科研技术积累出来的团队，我院在华北、华南、华中、华东、西北等地区，建立27大分院及配套实验室。秉承母校校训，以严谨、求实的工作态度,为数千家企业客户提供产品研发、成分分析、材料检测、工业诊断、模拟测试、大型仪器测试、可信性验证等专业技术服务，还为全国范围内的律师事务所、医院、高等院校、提供专业技术务。北京清析技术研究院经过几十年的团队技术积累，技术研究院下设环境检 ... | ||
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