转化是将外源 DNA分子导入到受体细胞,使之获得新的遗传特性的一种方法。转化所用的受体细胞一般是限制 -修饰系统缺陷变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶( R- , M-)。将对数生长期的细菌(受体细胞)经理化方法处理后,细胞膜、的通透性发生暂时性改变,成为能允许外源 DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的 DNA分子通过复制和表达实现信息的转移,使受体细胞具有了新的遗传性状。将经过转化的细胞在筛选培养基上培养,即可筛选出转化子(带有异源 DNA分子的细胞)。
关于质粒DNA转化实验，北京清析技术研究院可提供质粒DNA转化实验等检测项目。同时，北京清析技术研究院可对细菌质粒，重组质粒，耐药质粒，大肠杆菌质粒，载体质粒，灰色链霉菌，嗜热脂肪芽孢杆菌质粒，假结核耶氏菌等进行质粒DNA转化实验。
实验步骤
1、准备质粒DNA
从宿主细胞中提取含有所需质粒的DNA，并通过酶切或PCR扩增等方法纯化目标质粒DNA。
2、制备目标细胞
选择目标宿主细胞，并通过培养培养基中生长至合适的阶段。
3、转化DNA
制备化学转化物质(如钙化剂或聚乙二醇)，并将宿主细胞与质粒DNA和转化物质混合。此时，转化处理会造成细胞膜需要对质粒DNA进行内向转运，从而实现外源质粒DNA的导入。
4、分离新生细胞
将混合物培养于适当的条件下，以促进新生细胞的发育。在此过程中，只有有效转化的细胞才会表现出质粒DNA所含有的突变表型，例如抗生素耐药性。
5、筛选克隆
将分离的新生细胞在含有选择性抗生素的培养基上进行生长筛选。只有成功转化并集成了质粒DNA的细胞才会继续生长下去。
6、检测质粒DNA
将确认保存的克隆菌种进行DNA提取，并通过某种检测方法来确认实验成功。例如，可以通过PCR扩增、限制内切酶切割或者基于测序技术等方法来检测质粒DNA。
检测标准
1、T/SHSYCXH 10-2022 质粒DNA超螺旋构象的检测毛细管凝胶电泳法
