内酰胺酶通常指的是β-内酰胺酶。β-内酰胺酶是耐药细菌针对内酰胺类抗生素分泌的一类酶,可以与β-内酰胺环结合,使β-内酰胺环裂解而被破坏,失去抗菌活性。是这类细菌耐药的主要原因。
分类
1、头孢菌素水解酶(Amp-C酶)
产生菌主要系革兰阴性菌,如假单胞菌、肠杆菌、不动杆菌和克雷伯杆菌等,由染色体介导。
2、青霉素酶和超广谱酶
包括革兰阳性菌的青霉素酶,质粒介导的TEM和SHV酶及其衍生物组成的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、羧苄青霉素酶、邻氯青霉素酶(OXA酶)和由沙雷菌属与肠杆菌属产生的非金属碳青霉烯酶。
3、金属酶
由假单胞菌属、脆弱拟杆菌属、产黄菌属、沙雷菌属及嗜麦芽黄单胞杆菌属产生的可水解碳青霉烯抗生素的金属酶。
关于内酰胺酶,北京清析技术研究院可提供活性、总蛋白含量、水分含量、重金属含量、微生物检测、残留农药检测、气味检测、颜色检测、酸度检测、沉淀物检测等检测项目。北京清析技术研究院可对食品、化妆品、饮料、药品、农产品、水产品、环境样品、肉制品、奶制品、果蔬制品等进行内酰胺酶的检测。
检测方法
1. 活性测定法
通过测定内酰胺酶的催化活性来确定其含量,常用的测定方法有亚甲蓝法、苏丹Ⅲ法和三氯乙酸法等。这些方法通过观察酶催化产生的颜色、光谱或其他物理性质的变化,来间接或直接测定内酰胺酶的活性。
2. 免疫测定法
利用特异性抗体与内酰胺酶结合来检测其含量。包括免疫沉淀法、免疫层析法、免疫荧光法和酶联免疫吸附测定法等。
3. 基因表达测定法
通过检测内酰胺酶的编码基因的转录水平和翻译水平来推测其含量。常用的方法包括实时荧光定量PCR、Northernblotting和Western blotting等。
4. 代谢产物分析法
通过分析内酰胺酶代谢产物的含量来间接推测其活性和含量。例如利用质谱分析法测定内酰胺酶代谢产物的质谱图谱,从而推测其含量和活性。
检测标准
1、NY/T 3313-2018 生乳中β-内酰胺酶的测定
2、SN/T 3979-2014 乳及乳制品中β-内酰胺酶的测定方法杯碟法
3、SN/T 4533.1-2016 商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺酶方法一
4、DB21/T 2870-2017大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型PCR检测方法
5、SN/T 3028-2011 出口蜂王浆中β-内酰胺残留量测定方法酶联免疫法
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