耶拿C5专业显微镜成像系统
这款相机是Jenoptik的“Progres CCD RoutineCamera”系列中的五百万像素的制冷型号,zui大分辨率2580*1944,像素尺寸3.4μm,位数12bit,降温15℃,厂家声明的特色是“Visualizeexactcolors”,即色彩还原度好。根据参数,应该是定位于明场高分辨彩色图像的拍摄。相机外形极具个性,不同于常见相机的圆柱形或立方体。通过C接口与显微镜相连,通过1394a火线与计算机上的1394板卡相连,使用ProgResCapturePro软件采集图像。软硬件安装简单快捷,一次成功。
安装在倒置显微镜上的C5相机
一、明场图像拍摄
软件启动迅速,界面一目了然,不看说明书也能完成简单的拍摄操作。如图所示,左上角“Live”键预览,“Capture”键拍摄,可以设置自动保存,但在非预览状态下不能拍摄。曝光时间可以通过鼠标滚轮控制滑动条来轻松设置,但滑动条的数值不能连续变化。
ProgRes CapturePro软件的图像采集界面
尝试对体外培养的原代海马神经元进行自动参数拍摄,结果如图所示。自动曝光快速、准确,并且值得称赞的是可以设置自动曝光的增益补偿。这个重要的小功能在我用过的一些采集软件上都没有,造成一旦自动曝光不符合实际要求就只能改用手动曝光。自动白平衡准确,设置时软件提示要将光源调到zui亮,降到30%亮度,似乎想要一次设置就能适应所有的亮度情况。每次拍摄完软件总有1~2秒的停顿,但尚可接受。
自动曝光的相差图像1
自动曝光的相差图像2
使用了取点模式的自动白平衡,颜色有所偏差
二、荧光图像拍摄
耶拿C5不是一款针对荧光拍摄的相机,对其荧光表现并不期待,但仍然希望它能兼顾较强的荧光,满足用户多样的需求。选择了中等强度荧光的样品,使用NA=1.45的油镜成像,肉眼下荧光清晰分明。使用耶拿C5的自动曝光模式进行拍摄,结果跳出曝光时间超出范围的警告。如下图所示,图片能反映出荧光的范围和形状,但对比度不佳,细节损失较多。使用黑平衡后,效果也没有改善。由于预览时图像质量更低,荧光稍弱的视野就模糊不清,很难对焦。没有找到强度阈值调节功能。
自动曝光的荧光图像1
自动曝光的荧光图像2
对荧光图像2使用自动黑平衡模式
三、与自用相机的对比
很遗憾这次没有拿到同一级别的相机进行对比,而是找了个制冷的黑白CCD。希望这种跨级比较也能帮助大家从中把握耶拿C5相机的大致成像水平。自用相机像素尺寸6.45μm,12bit,制冷到-20℃,是一款针对荧光成像的相机。
耶拿C5 自用相机
右图对比度好于左图
两张图片细节表现基本*
曝光时间*,左图对比右图有所差距
增加C5的曝光时间,左图的质量有所提高
增加C5的曝光时间,左图也反映出了一些较弱的荧光
四、特色功能
该软件还有一些特色功能,如荧光通道叠加、景深扩展、时间间隔拍摄等。这里只测试了荧光叠加功能。需要预先测试出zui佳的曝光时间,填入表格,再进行拍摄和叠加。叠加时不能单独调节每个通道,之前要仔细测试曝光时间。叠加效果尚佳,如图所示。
GFP通道
DAPI通道
荧光叠加
五、
该相机在明场方面的表现可圈可点,软、硬件成熟度高,方便易用,用户体验好,能够完全满足明场拍摄的需要。受限于CCD芯片,该相机的荧光表现很一般,但通过延长曝光时间可以满足一定的荧光拍摄要求。适用于荧光较强的样品,以及只需要表现荧光有无、或荧光形状的实验。例如细胞转染效率检测、细胞核计数、细胞活力检测等实验。耶拿C5是一款成熟可靠的、能够*表现明场图像的相机