圆二色光谱蛋白分析

圆二色光谱蛋白分析（Circular Dichroism, CD）是用于研究蛋白质分子结构和折叠特性的光学光谱技术。它通过测量左旋和右旋圆偏振光吸收差异来提供关于蛋白质二级结构的信息，包括α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲的含量。其原理是基于蛋白质中的手性氨基酸残基和肽键等对左旋和右旋圆偏振光的吸收存在差异，当平面圆偏振光通过蛋白质溶液时，光活性中心对左右圆偏振光的吸收不相同，产生吸收差值，进而使偏振光矢量的振幅产生差异，形成圆二色性。这种吸收差异与光的波长的关系曲线即为圆二色光谱曲线。圆二色光谱蛋白分析因其快速、非破坏性、对样品量要求小等优点，广泛应用于蛋白质结构研究、药物开发和生物化学研究中。尤其在蛋白质折叠动力学、构象变化以及与配体相互作用的研究中，圆二色光谱蛋白分析提供了独特而宝贵的见解。

一、圆二色光谱蛋白分析分析方法

1、样品制备

需将蛋白质样品溶解在合适的缓冲溶液中，制成一定浓度的溶液。蛋白质浓度通常在 0.1-1mg/mL 之间，具体浓度可能因蛋白质性质和仪器要求而有所不同。要确保样品的纯度和均一性，避免杂质对光谱的干扰。

2、光谱测量

将样品溶液放入圆二色谱仪的样品池中，选择合适的波长范围进行扫描。通常在远紫外区（190-250nm）可分析蛋白质的二级结构，在近紫外区（250-320nm）可获取有关蛋白质三级结构的信息。扫描速度、光谱通带等仪器参数需根据样品和实验要求进行优化设置。

3、数据分析

对测量得到的圆二色光谱数据进行处理，如基线校正、归一化等，以消除实验误差和仪器误差。可通过与已知结构的蛋白质光谱进行比较、使用专门的软件进行解卷积或采用数学模型拟合等方法，提取出蛋白质的结构信息，如二级结构类型及相对含量、三级结构的变化等。

二、圆二色光谱蛋白分析主要应用

1、二级结构分析

可以区分 α- 螺旋、β- 折叠、β- 转角和无规卷曲等不同的蛋白质二级结构。每种结构在远紫外区域都有独特的 CD 光谱特征，如 α- 螺旋结构在 190-250nm 范围内有典型的双负峰。

2、三级结构研究

在近紫外区的 CD 光谱，主要来自芳香氨基酸残基的环境变化，可反映出蛋白质的折叠状态、二硫键的形成与位置等三级结构信息。

3、结构变化监测

可用于监测蛋白质结构在不同条件下的变化，如 pH 值、温度、溶剂条件的改变或与其他分子的相互作用等。通过观察光谱的变化，了解蛋白质的稳定性和结构变化趋势，为研究蛋白质的折叠与变性过程提供信息。

4、蛋白质 - 蛋白质及蛋白质 - 配体相互作用研究

分析蛋白质在与其他蛋白质或小分子配体结合时的 CD 光谱变化，研究它们之间的相互作用及其对蛋白质结构的影响，有助于理解生物体内蛋白质的功能调节机制和药物研发中的药物—靶点相互作用。

圆二色光谱蛋白分析的优势在于其能够快速提供关键的结构信息，而不需要大量的样品制备。这不仅加快了研究进程，还节省了宝贵的样品和资源。圆二色光谱蛋白分析的非破坏性特点也使其成为监测蛋白质在动态条件下结构变化的理想工具，为研究蛋白质折叠病、如阿尔茨海默症和帕金森症等疾病机制提供线索。百泰派克生物科技致力于为客户提供高质量的圆二色光谱蛋白分析服务。我们的科学团队拥有深厚的zhuānyè知识和丰富的经验，能够为客户提供个性化的分析方案。通过我们的服务，您可以获得准确、可靠的蛋白质结构信息，助力您的科研或产品开发项目。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.zhuānyè生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，zuì后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标进行表征，百泰派克生物科技可做到检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从zuì小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等zhuānyè服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

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6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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