蛋白质表达和蛋白质纯化是生物技术领域中两个不同的概念,它们在蛋白质研究和生产过程中扮演着不同的角色。
检测流程:
1、沟通需求:了解待检测项目,确定检测范围;
2、报价:根据检测项目及检测需求进行报价;
3、签约:签订合同及保密协议,开始检测;
4、完成检测:检测周期会根据样品及其检测项目/方法会有所变动,具体可咨询检测顾问;
5、出具检测报告,进行后期服务;
公司优势:
1、检测周期短
2、先进的仪器设备以及强大的工程师团队
3、独立的实验室,合理分工
4、签订保密协议,注重客户隐私
5、数据严谨:出具的报告经多层审核
蛋白质表达与纯化检测范围:
E.coli 原核表达、酵母表达(毕赤酵母)、昆虫细胞表达(杆状病毒)、哺乳动物细胞表达等
蛋白质表达方法:
1. 大肠杆菌表达系统:利用大肠杆菌作为宿主细胞表达目标蛋白质,常用的表达质粒包括pET系统、pGEX系统等。
2. 酵母表达系统:使用酵母细胞(如酿酒酵母)表达蛋白质,例如Pichia pastoris表达系统。
3.昆虫细胞表达系统:利用昆虫细胞(如Sf9或Sf21细胞)表达蛋白质,常用的是杆状病毒表达系统(如Baculovirus表达系统)。
4. 哺乳动物细胞表达系统:使用哺乳动物细胞(如CHO细胞)表达蛋白质,适用于高度复杂的蛋白质结构。
蛋白质纯化方法:
1. 亲和层析:利用目标蛋白质与亲和柱上的亲和基团(如His标签、抗体等)的特异结合,实现目标蛋白质的纯化。
2. 凝胶过滤层析:通过凝胶过滤柱,根据蛋白质的分子大小进行分离和纯化。
3. 离子交换层析:利用蛋白质在离子交换柱上与离子交换基团之间的电荷交换作用来分离和纯化蛋白质。
4. 透析:通过选择性渗透性膜将目标蛋白质与其他小分子(如盐、小分子结合剂)分离。
5. 逆流层析:利用逆流对柱中的样品进行多次通过,实现目标蛋白质的分离和纯化。
蛋白质表达与纯化相关仪器:
1. 分离柱和层析系统:包括亲和层析柱、凝胶过滤柱、离子交换柱等不同类型的色谱柱以及层析系统。
2. 分析仪器:如SDS-PAGE凝胶电泳仪、西方印迹仪等用于蛋白质的分子量和特定蛋白质的定量分析。
3. 冰箱和冷冻离心机:用于保存和处理蛋白质样品的低温设备。
4. 超高速离心机:用于分离和沉淀蛋白质与其他细胞组分。
5. 蛋白质纯化自动系统:利用自动化技术实现蛋白质的批量纯化和高通量处理。