残留蛋白检测测定实验室

检测方法

1、酶联免疫吸附（ELISA）法

ELISA法是蛋白含量检测使用广泛的方法，原理是基于抗原抗体的免疫反应，结合酶的高效催化对信号进行级联放大，从而对待测物进行定性或定量分析的方法，具有高特异性和高灵敏度的优势。ELISA法适用于宿主蛋白质和ProteinA的残留检测以及其他有商品化ELISA试剂盒的蛋白成分检测。

2、考马斯亮蓝（Bradford）法

Bradford法是中国药典收录的蛋白质含量测定法中的第五法，原理是在酸性溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白质分子中的碱性氨基酸（精氨酸）和芳香族氨基酸结合形成蓝色复合物，从而对蛋白质的含量进行定量分析。Bradford法是一种通用型的检测方法，适用于发酵或酶法工艺来源的化药中总蛋白残留检测。

3、LC-MS/MS法

基于LC-MS/MS的特征肽段法检测蛋白含量是ELISA法的补充，相较于ELISA法具有更好的特异性，且不受特异性的抗体等关键试剂的限制。

原理是采用酶解后的特征肽段作为替代监测整体蛋白的含量。实验流程如下所示：

1) 根据蛋白的理论序列筛选用于定量的特征肽段；

2）建立特征肽段的液质方法；

3）样品经蛋白酶酶解；

4）酶解后的样品经质谱检测，从而定量样品中蛋白的含量。

检测标准

1、T/QGCML 1839-2023 丝素蛋白膜碳酸钠残留测试技术规范

2、T/DYZL 006-2019 乳免疫蛋白粉 α-乳白蛋白

3、SN/T 5094-2018 出口禽蛋及蛋制品中氟虫腈残留量的测定液相色谱-质谱法