转化酶能特异地催化非还原糖中的β-D-呋喃果糖苷键水解，具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，也能催化棉子糖水解，生成密二糖和果糖。关于转化酶，北京清析技术研究院可提供酶活性检测，分析化验，含量检测，浓度检测，成分分析，定性定量检测，未知物分析鉴定等检测项目。同时，北京清析技术研究院可对蔗糖转化酶，乙醇转化酶，C3转化酶，酸性转化酶，蜂蜜转化酶，脱脂转化酶等进行检测。
提取方法
1、酵母提纯
酵母离心(8 000 r/min)15min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤，离心，再洗涤，重复数次，直到菌体呈白色，倾出上清液，将不含杂质的干净的酵母保存待用。
2、粗酶液的制备
准确称取离心分离后的酵母10 g，加入60 mL 0．5mmol/L的SDS溶液溶解，在pH值为5．5、50℃水浴中加热12 h后取出，4℃、10 000 r/min离心20min．上清液即为粗制酶液。4℃保存。
3、葡萄糖标准曲线的制定
以葡萄糖含量为横坐标。以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
4、蛋白质标准曲线的制定
以蛋白质含量为横坐标。以吸光度为纵坐标。绘制标准曲线．
5、转化酶活性的测定
稀释酶液0．5 mL．加入0．3 mL pH值为4．6、0．1mol/L的NaAc—HAc缓冲液．0．2 mL 0．1 mol/L的蔗糖溶液．37℃准确反应15rain后．加0．125 mL lmol/L的NaOH溶液中止反应。用DNS法在540 nm波长下测定形成的还原糖量。在该条件下。转化酶液1min转化底物蔗糖生成1g葡萄糖定义为1个活力单位。
6、粗酶的乙醇初步分离
在所提粗制酶液中加入乙醇使其质量分数达30%，4℃放置过夜，4℃、10000 r/min离心15 min．取上清液．追加乙醇使其质量分数达50%，4℃放置1 h，4℃、11 000 r/min离心15min．弃上清液．沉淀用双蒸水溶解．4℃保存。经SDS抽提法提取．质量分数50%的乙醇沉淀所得的酶液用透析法(pH值为7.0的0.05mol/L%s—HCI缓冲液)充分透析。所得透析液4℃保存。
7、提取啤酒酵母中转化酶
工艺条件优化：在单因素试验的基础上。选取SDS摩尔浓度、pH值、提取温度、提取时间4个条件，考察其对酵母转化酶抽提效果的影响．采用4因素3水平正交表L934。做正交试验。
8、转化酶的纯化
采用O一琼脂糖凝胶FF阴离子交换柱层析纯化粗酶液。将SDS抽提法提取出的转化酶活性高的粗制酶液经质量分数50%的乙醇沉淀，溶解透析后，过Q-琼脂糖凝胶FF阴离子交换柱(用pH值为7．0、0．05mol/L Tris-HCl缓冲液充分平衡)。用0～1 mol/L、60 min线性梯度的NaCI溶液(内含pH值为7．0、0．05mol/L%s-HCI缓冲液)洗脱。体积流量为0．5mL/min，每管收集mL。测定各管洗脱液的转化酶活性与蛋白质含量，合并转化酶活力高的若干管流出液。流出液经过透析脱盐,真空干燥后即为纯化的酵母转化酶。
检测标准
1、GB/T 40152-2021 蜂蜜中蔗糖转化酶的测定分光光度法
2、DIN 10759:2016-12蜂蜜分析.蔗糖酶活性的测定.西根塔勒法
3、T/NAIA 010-2020 土壤蔗糖酶活性的测定3,5-二硝基水杨酸比色法
4、DIN 10759:2016蜂蜜的分析研究.蔗糖酶活性的测定.西根哈勒法
5、DIN 10759-2:1998蜂蜜的分析.蔗糖酶活性的测定.第2部分:哈多恩法
6、DIN 10759 E:2015-10 蜂蜜的分析研究 蔗糖酶活性的测定西根哈勒法
7、GOST R 54386-2011蜂蜜.蔗糖酶活性,淀粉酶活性和不溶解物质的测定方法
8、DIN 10759-1:1998蜂蜜的分析研究.蔗糖酶活性的测定.第1部分:西根哈勒法
以上就是关于转化酶检测的介绍，北京清析技术研究院提供分析、检测、测试、鉴定、研发等技术服务，已获得CMA、CNAS等资质证书。总院位于北京，在上海、广州、深圳、合肥、南京、成都、武汉等地区设立27家分院，工程师一对一咨询，寄样或上门任您选择，为您提供便利的检测服务。
