关键词：蛋白质N端测序,Edman测序,质谱测序,蛋白质测序,序列分析,蛋白质组学,代谢组学,tmt,抗体测序,itraq,蛋白质谱鉴定,蛋白质组学,代谢组学,tmt,抗体测序,itraq,蛋白质谱鉴定,蛋白质组学,代谢组学,tmt,抗体测序,itraq,蛋白质谱鉴定"
N端是一个蛋白质或多肽的起点。它影响蛋白质的亚细胞分布、降解和转化率。蛋白n端序列分析对于蛋白质功能研究具有重要意义。在药物蛋白质中经常观察到一些N端的变化，包括N端信号序列的不完全处理、焦谷氨酸盐的形成、以及N端甲硫氨酸残基的去除缺乏。N端测序是一项重要的质量控制分析。ICHQ6B也要求对药物进行N端序列确认。
Edman降解法N端测序：Edman测序反应是一个循环过程，N端氨基酸残基被反复裂解，可使用色谱法对分离出的氨基酸进行鉴定。因偶联和裂解反应的效率不是1_0_0_%，限制了可测序的残基数。
优点：1.可以准确分析N端氨基酸序列，特别是能辨别异亮氨酸和亮氨酸、谷氨酰胺和赖氨酸；2.直接分析氨基酸信息，不需要任何蛋白质数据库。它可以识别未登记在数据库中的未知蛋白质；
缺点：1. N端已被化学修饰或封闭的肽不可用；2. 低通量分析。
关于样品：蛋白质可以以SDS或天然聚丙烯酰胺凝胶片的形式在溶液中，或印迹到PVDF膜上提交。
溶液中：样品应无干扰缓冲液、盐和洗涤剂。如果干扰缓冲液、盐不可避免，清理后仍有可能对材料进行测序。应避免缓冲液中的胺(如Tris、乙醇胺和甘氨酸)。
凝胶中：将感兴趣的凝胶切片切下来，放入微量离心管中。蛋白质可以从聚丙烯酰胺中洗脱下来。凝胶染色尽量使用考马斯蓝R-250或G-250代替银染色剂。
PVDF膜上：将SDS-PAGE分离的蛋白质印迹在PVDF膜上。蛋白质可以用考马斯蓝R-250、酰胺黑、胭脂红S或SyproRuby染色(不建议银染)。
百泰派克生物科技-您身边的生物质谱专家
北京百泰派克生物科技有限公司（Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd.简称BTP）从事以生物质谱为依托的生物药物表征，大分子物质（包括蛋白质、多肽、代谢物）质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务，业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台，服务3000+企业，10000+客户的选择，致力于为您提供y_ō_u|z_h_ì的生物质谱分析服务!