鉴定未知蛋白可根据未知蛋白质的具体情况进行鉴定方法的选择,未知蛋白质的鉴定可以采用多种方法进行。百泰派克生物科技提供未知蛋白的质谱法鉴定服务。
鉴定未知蛋白
识别未知蛋白质是许多生物医学研究人员经常面临的问题。鉴定的两个方面是为该蛋白质指定一个有意义的名称,以及确定该蛋白质是否与另一已知蛋白质相同、密切相关或是已知蛋白的变异形式。目前,用于蛋白鉴定的技术包括有图象分析技术、微量测序、氨基酸组分分析和质谱技术。
未知蛋白鉴定方法简介
图象分析技术以二维凝胶电泳技术为基础,通过分析2-DE图象鉴定蛋白点。图象分析包括斑点检测、背景消减、斑点配比和数据库构建。因2-DE凝胶的质量不一等问题,鉴定结果常常与正确值有出入,因此一般需要联合其他技术一起进行,如氨基酸组分分析和质谱技术。
微量测序的一个典型代表是基于Edman降解的N端测序,Edman测序是当下鉴定未知蛋白质的主要技术之一,目前已实现自动化。但Edman测序速度较慢,每40分钟测一个氨基酸,不适合高通量分析。
鉴定未知蛋白
氨基酸组分分析利用蛋白质特异的氨基酸组分特征与数据库中的蛋白质进行比对匹配,从而实现蛋白质的鉴定。在氨基酸组分分析中需要对蛋白进行酸性水解,因为不足的酸性水解或者部分降解会产生氨基酸的变异,所以该技术可联合蛋白分子量、等电点等其他蛋白属性完成鉴定。
质谱技术鉴定蛋白质是通过肽质量指纹图谱或肽序列标签数据与数据库中的数据进行匹配,从而鉴定一个蛋白质。质谱鉴定蛋白质常常可与液相色谱技术联合进行,利用鸟枪法策略,首先用色谱高效分离蛋白或多肽的酶切产物,再用质谱分析,可实现蛋白质及其混合物的准确鉴定。
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