基于SDS-PAGE的蛋白分离

2024-12-22 09:00 117.176.203.244 1次
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北京百泰派克生物科技有限公司商铺
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北京百泰派克生物科技有限公司
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91110105MA002YHD5L
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品牌名称
百泰派克生物科技
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关键词
SDS PAGE,蛋白分离,蛋白质组学,代谢组学,tmt,抗体测序,itraq,蛋白质谱鉴定
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北京市经济技术开发区科创六街88号院
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18244218588
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产品详细介绍


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十二烷基硫酸钠聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)在蛋白表达分析等科研工作中经常用到。可用于获取蛋白质样品的电泳图谱,结合其它基于质谱的蛋白质鉴定服务对样品进行分析或纯化,用于复杂生物样品的蛋白质谱分析。

百泰派克生物科技可根据您的需求,提供基于1D SDS-PAGE或2DSDS-PAGE的蛋白分离服务:基于我司优化的标准操作流程,使用Bio-Rad Mini-PROTEAN® Tetra凝胶系统进行1DSDS-PAGE蛋白质分离。将蛋白样品(5-20 ug)用上样缓冲液稀释到一定浓度并加热(沸水浴5min),根据样品的分析目的选择适当浓度的凝胶并将样品上样到凝胶孔中,加入电泳缓冲液,在80V电压下恒压分离15min,在120V电压下恒压分离60 min。分离后卸下胶板,将凝胶用考马斯亮蓝染色或银染染色。

2D SDS-PAGE蛋白分离使用IPG (pH3-10)胶进行一维等电点聚焦,SDS-PAGE胶二维电泳进行Mw分离,实现蛋白分离。样品使用超滤管进行纯化,并将溶液体系替换为2Dlysis buffer (30 mM Tris- HCl, pH 8.8, containing 7 M urea, 2 Mthiourea and 4%CHAPS)进行等电点聚焦。聚焦好的胶条胶面朝上放在干的厚滤纸上,挤去多余水分、矿物油及多余样品,用缓冲液溶胀15min后,将胶条继续在平衡缓冲液中平衡15min。将胶条胶面朝上放在凝胶的长玻璃板上,使用低熔点琼脂糖封胶后,将凝胶转移至电泳槽中,起始使用低电压,待样品在完全走出IPG胶条,浓缩成一条线后,加大电压,待溴酚蓝指示剂达到底部边缘时即可停止电泳。卸下胶板,将凝胶用考马斯亮蓝染色、银染染色或荧光染色。使用TyphoonTRIO (GE Healthcare)对胶图进行扫描,扫描得到的胶图通过Image Quant software (version6.0, GE Healthcare)和DeCyder 5.0 (GE Healthcare)进行分析。

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百泰派克2D SDS-PAGE示例

关于样品:

1-. 液体或固体样品均可;

2. 1D SDS-PAGE一般需要2-30 µg蛋白,2D SDS-PAGE一般需要50-1000 µg蛋白;

3. 考马斯亮蓝染色、银染染色或荧光染色的蛋白质均可。


百泰派克生物科技-您身边的生物质谱专家
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd.简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务,业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台,服务3000+企业,10000+客户的选择,致力于为您提供y_ō_u|z_h_ì的生物质谱分析服务!


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成立日期2015年12月23日
法定代表人王素芹
注册资本100
主营产品蛋白组学,从头测序,生物制药分析,代谢组学
经营范围技术开发、技术推广、技术转让、技术咨询、技术服务;货物进出口、技术进出口、代理进出口;销售机械设备、化工产品(不含危险化学品)。(依法须经批准的项目,经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动。
公司简介百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发 ...
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