随着现代生物学的发展,“平均值”这个词已经不能满足我们的研究需要了,我们需要更了解细胞之间的差异性,于是针对单细胞的各类研究技术应运而生。单细胞质谱流式(MassCytometry)技术是利用质谱技术对单细胞进行多参数检测的流式技术,它既有传统流式细胞术能够高速分析的特点,又兼并了质谱检测的高分辨能力。单细胞测序和质谱流式都是目前非常强大的技术,越来越多的高分文献都是将两者结合使用,两者不能说有优劣之分。区别在于质谱流式针对蛋白进行检测,能够指定检测蛋白,避免漏掉丰度很低但又很重要的蛋白,且质谱流式技术因为其通量相当的高,可以实现大量细胞的检测,都是对单细胞测序一个很好的补充。百泰派克生物科技单细胞质谱流式技术采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,*后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。
McCarthy, R. L. et al. J. Vis. Exp.2017.
单细胞质谱流式技术
单细胞质谱流式技术优势:
1,技术先进,填补技术空白
单细胞质谱流式采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标进行表征,百泰派克生物科技可做到检测51个目标蛋白。
2,分析数量大,成本较低
单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。
3,应用前景大
a)流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;
b)将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;
c)可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
单细胞质谱流式实验流程
百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行样品分析
单细胞质谱流式技术数据分析
单细胞质谱流式技术的应用
质谱流式可做的功能分析可分为12类:
(A) 表型表征
(B) 细胞内细胞因子测定
(C) 细胞内信号状态表征
(D) 细胞体积和尺寸测量
(E) 细胞活力鉴别
(F) 细胞周期鉴定
(G) 增殖示踪
(H) 受体占有率测定
(I) 基于四聚体的抗原特异性T细胞筛选
(J) 染色质修饰分析
(K) RNA 和蛋白质共检测
(L) 成像质谱流式细胞术
单细胞质谱流式技术在疾病研究、疾病治疗中均有广泛应用,以新型冠状病毒研究为例:
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百泰派克生物科技-您身边的生物质谱专家
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Biotech Pack Scientific Co., Ltd.简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务,业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等。7大质量控制检测平台,服务3000+企业,10000+客户的选择,致力于为您提供**的生物质谱分析服务!