酶联免疫斑点技术(EnzymeLinked ImmunospotAssay,ELlSPOT)是细胞免疫学研究中敏感的检测方法之一，可以在单细做水平对抗体分泌细胞（ASC）及细胞因子（CK）分泌细胞进行检测。由于是单细胞水平检测，ELISPOT 比ELISA和有限稀释法等具有更高的灵敏性。能从20万-30万细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的活细验进行功能性检测，具有较高的特异性、直观可信度高，并且易操作，已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中，在国内外免疫学界获得了广泛的应用。
AIDEliSpot Reader Classic
酶联免疫斑点分析仪
德国艾迪（AID）是的研发并生产酶联斑点分析仪的厂商，早在全球上市酶联斑点分析仪，自AIDEliSpot Reader上市以来，已经有超过1500多家实验室正在使用AID的EliSpot Reader-酶联免疫斑点分析仪。
AID EliSpotReader硬件和软件完全符合欧盟CE 认证，FDA 21CFR part11规范、GMP/GLP标准。
AIDEliSpot Reader Classic 主要配置：
• 德国制造高分辨率科研级别相机，彩色CCD芯片，清晰捕捉微小斑点
• QuadPack高精度电动载物台：全自动控制，位移，各孔自动居中
• LED环形无影照明光源：照射均匀，可清晰分辨因孔侧壁反光造成的幻影现象，准确识别孔底边缘
• 水准的电动光学镜头：镜头自动聚焦，自动曝光调节，保证清晰捕捉微小斑点
• 独立高配置计算机系统：与分析仪独立，有效减少故障率，预装正版Win7及Office软件等
• ELISPOT软件：全自动读板，自动计数分析；同步完成斑点图像扫描、斑点计数与结果分析；
AIDEliSpot Reader 软件功能：
斑点图像采集与计数：
全自动读板，自动采集各孔图像；
自动计算斑点数量和斑点相关信息如大小、面积、光密度等。
内置不同因子参数设置，直接调用；
CountAID功能协助优化读数参数，并具有智能参数记忆功能。
结果分析：
直接判断阴阳性检测结果；
诊断模块AIDiagnostic，适用于临床诊断用ELISPOT实验的结果判读，单独输出每例病人斑点图像和结果报告；
统计分析各孔斑点分布、对比免疫反应强弱、细胞因子分泌量化比较等。
数据输出与质控：
可输出单孔图像、任意孔及整板图像；
多种保存格式，Excel, Txt,PPT等；
输出数据可自定义包含斑点数,SFU,光密度强度,Activities，斑点分布图表等；
包含质控模块，操作历史自动记录，符合GLP规范。
Applications- 酶标ELISPOT应用文献 :
Science 1998,279: Quantitation of HIV-1–Specific Cytotoxic T Lymphocytes andPlasma Load of Viral RNA.Graham S.Ogg, Xia Jin,et al.
Science 1998,281: Identification of LFA-1 as a candidate autoantigen intreatment-resistant Lyme-Arthritis. Gross DM, et al.
Nature 2005,433,887-892.Toll-likereceptor 3 promotes crosspriming to virus-infected cells. OliverSchulz1*,et al.
Lancet 2005,366: 1443-1451. Effect of BCG vaccination on risk of Mycobacteriumtuberculosis infection in children with household
tuberculosis contact:a prospective community-based study. Ahmet Soysal,et al.
Lancet 2003Apr 5;361(9364):1168-73. Comparison of T-cell-based assay withtuberculin skin test for diagnosis ofMycobacterium tuberculosis infection in aschool tuberculosis outbreak. Ewer K, et al.
Blood 2009,114:4089-4098. Interleukin-21 restores immunoglobulin production exvivo in patients with common variable immunodeficiency and selectiveIgA deficiency. Stephan Borte, et al.
AID iSpotReader荧光酶联免疫斑点分析仪
（可见光/荧光双重检测功能的ELISPOT分析仪）
AIDiSpot Reader 主要配置：
• 德国制造光学系统高分辨率科研级别相机，彩色CCD芯片，高品质成像，保证微小斑点及斑点晕的识别
• 水准的电动光学镜头：镜头自动对焦，自动曝光调节，保证清晰捕捉微小斑点
• 荧光照明系统：高能氙灯，激发效率高，波谱范围广250-1000nm，是适合荧光成像的激发光源
• 4-8位滤光片轮，全自动切换，至少标配FITC和Cy3荧光滤光片，其他波长可加配
• 独立高配计算机系统：与分析仪独立有效减少故障率，配置实时更新
• ELISPOT软件：全自动读板，自动计数分析；自动叠加不同荧光通道图像，找出共染色斑点（共分泌细胞）
AIDiSpot Reader 专利的软件功能及技术先进性：
专利的荧光图像Overlay技术保证多色因子共分泌斑点准确识别，避免酶标双色检测中因不同细胞因子分泌量不均而引起的误判
全自动判读：iSpot对板上每孔的各种颜色荧光斑点分别成像，例如检测FITC标记的IFN-γ分泌情况和Cy3标记的IL-2分泌情况，软件再自行将不同荧光图像叠加（Overlay），准确识别共分泌（IFN-γ&IL-2）细胞。整个过程全自动，无需人工干预；
性能稳定, 兼容扩展性好：高能激发保证微弱荧光信号检测，窄带滤光片保证特异性信号检测，多色扩展只需加配滤光片；
技术先进性：早在全球上市酶联斑点分析仪，1996年发明《应用Elispot方法检测血液细胞活性》的专利；唯一拥有《以荧光滤光片为基础进行荧光多色ELISPOT的检测系统》的专利PCT/EP2008/009112‐FluoroAID；
学术发表性：从荧光款2007年上市到现在，80%荧光EliSpot应用SCI文献是由 发表的，被公认作荧光检测的佳选择 ；
国际认可度高：与牛津大学Oxford免疫学实验室密切合作开发是其用于结核的酶联斑点(T-Spot)诊断的专用工具；国际艾滋病、疫苗行动组织（IAVI）指定品牌；全球Elispot试剂盒开发实验室（如瑞典Mabtech）专用品牌。
Applications- 荧光ELISPOT应用文献 :
NatureMedicine. 2013 Oct;19(10):1305-13. Cellularimmune correlates of protection against symptomatic pandemicinfluenza.Saranya Sridhar, &AjitLalvani,et al.
Infection, 2014Jan. IGRA-positive patients and interferon-gamma/interleukin-2signatures: Can the FluoroSpot assay providefurther information? P. Bittel, etal.
Journal ofinternal medicine, 2013. Decreased functional Tlymphocyte-mediated cytokine response in patientswithchemotherapy-inducedneutropenia. Öhrmalm L., et al.
Methods MolBiol.2012;792:77-85. Dual- and triple-color fluorospot. Ahlborg N,Axelsson B.
ELISPOT应用领域(Application):
免疫学基础研究：T细胞和B细胞，Th0/Th1/Th2细胞转换分析
疫苗研究：ELISPOT是检测和评价疫苗的细胞免疫的有效方法。国际上普遍采用ELISPOT方法监测HIV疫苗研究中的免疫应答反应，在国际艾滋病疫苗行动计划中，采用ELISPOT法对T细胞功能进行评价。
药物筛选：化合物和药物免疫学反应的筛选感染性疾病诊断与研究：例如结核病的临床诊断，莱姆病、艾滋病等传染病的研究
肿瘤免疫研究：已用于分析和评价在癌症病人中诱导肿瘤特异的T细胞的疫苗试验。治疗前后特异性细胞免疫应答水平的检测，可有效的评估治疗效果，对于治疗和用药提供重要的参考信息。
自身免疫病研究：调整机体免疫调节功能，对自身免疫病的治疗揭供更有效的措施
过敏研究：参与过敏机制的细胞因子研究，如IL-4
移植免疫研究：移植中排斥反应的预测
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