抗体制备技术有哪些方法?抗体制备工艺的3个阶段分享

更新:2023-02-10 13:58 发布者IP:36.112.91.50 浏览:0次
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  说到抗体制备,现阶段能选择的方法可谓数不胜数,而且因为公司技术实力不同、人源配备不同以及实验资源不同,使得抗体制备的方法也是各不相同。长期以来,杂交瘤系统占据抗体制备的头位,单随着基因技术的发展,噬菌体展示等更高难度的技术也应运而生。那么,想要得到抗体,具体该选择哪种方法呢?

    下面,义翘神州就和大家具体聊聊。

    1、杂交瘤技术。这个方法制作流程简单、产量高且特异性高。但是生产周期较长,不是所有抗原都可以采用这个方法,且对那些无免疫性和高毒性的抗原几乎完全无用,主要的是还需要对其进行人源化处理;

    2、重组抗体技术。制备周期短、抗原表位多、有效提升了抗体的亲和力,能够减少实验中动物的使用。但是对技术要求较高、产量相对来说更少,相对成本要更高一些;

    3、噬菌体展示技术。通过基因技术作用于噬菌体的外壳表达上,让蛋白得以在噬菌体外壳上表达。而后通过相应的分离技术,获得所需蛋白的方式。这个方法需要的技术实力较高,能够达到相应的实力的公司才能使用这个方法;

    4、酵母表达技术。先用于蛋白表达的宿主,酵母表达存在着难以比拟的优势。价格便宜、适合大规模生产等特点,但是转化率相对要低一些;

    5、杆状病毒表达系统。是常见的昆虫表达系统,具备较好的安全性,外源基因容量大、目的蛋白表达水平高等优点。但是培养成本高,而且难以形成种子批;

    6、哺乳动物表达系统。使用广,适合大批量生产。但是需要大量使用到动物,而且可能需要人源化后才能使用;

从如上一些分析我们不难看出,每个方法都纯在着优势和不足,所以,针对不同的需求,我们需要考虑当前适合的方法。还是我们常说的那句话,没有完美的方法,只有适合的方法。义翘神州为广大用户提供抗体制备和抗体定制服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。

抗体的生产制备历史和工艺决定了抗体生产的质量和类型。抗体生产制备工艺可分为三个阶段:传统方法免疫动物获得抗体、应用杂交瘤技术制备抗体和基因工程技术制备抗体。

1、传统方法免疫动物制备抗体:将通过各种方法获得的免疫原(抗原)注射至动物(比如大鼠、小鼠和兔等)体内,刺激动物体内B细胞分化成熟,产生、分泌抗体,再通过收集动物血清,分离纯化而获得成品抗体。由于早期免疫原制备、纯化技术和成本限制,早期通过传统方法制备的抗体多为多克隆抗体。此种方法成本相对较低,但需要使用大量动物,容易导致“虐待动物”,甚至会因为虐待动物而遭天价罚款,并禁止多克隆抗体销售。

2、应用杂交瘤技术制备抗体:1975年英国科学家Milstein和法国科学家Kohler将鼠源的B淋巴细胞同肿瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,杂交瘤细胞即具有B细胞的抗体生产、分泌功能,又具有肿瘤细胞的无限增殖功能。工艺上,首先采用皮下注射、腹腔注射和血管内注射等方式向动物体内注射免疫原,刺激动物产生特定的B细胞;然后处死动物,收集脾脏B细胞;体外融合B细胞和肿瘤细胞制备杂交瘤细胞,体外筛选、培养杂交瘤细胞;通过体外扩增杂交瘤细胞收集、纯化培养基上清获得抗体,或者在动物体内(血管内、腹腔等)注射杂交瘤细胞、收集和纯化动物体液(腹水、血清等)获得抗体。杂交瘤技术诞生了一代单克隆抗体,这种抗体特异性高,易于大量生产。

3、基因工程技术制备抗体:基因功能技术使得研究者能在体外重组——将任一基因片段插入到特定表达载体(质粒),通过将编辑好的质粒转入特定的细胞系和细胞系的体外扩增、培养,获得基因片段在体外的转录、翻译,从而制备抗体。基因工程技术使得抗体的生产更加快速,并使得人源化抗体更为便捷,进而成为临床应用的抗体药物,用于临床治疗。这一技术产生的抗体是特异性极高的均一抗体,易于工业化大量生产。

近几年,义翘神州致力于为科研机构和药企提供从抗原合成到抗体检测和生产的一站式定制抗体服务。凭借多年的抗体研发及生产经验,我们已经与很多国际制药公司建立了良好的合作关系,是全球Top10制药公司的抗体生产服务供应商。

全面的抗体制备及生产技术服务:

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