说到抗体制备,现阶段能选择的方法可谓数不胜数,而且因为公司技术实力不同、人源配备不同以及实验资源不同,使得抗体制备的方法也是各不相同。长期以来,杂交瘤系统占据抗体制备的头位,单随着基因技术的发展,噬菌体展示等更高难度的技术也应运而生。那么,想要得到抗体,具体该选择哪种方法呢?
下面,义翘神州就和大家具体聊聊。
1、杂交瘤技术。这个方法制作流程简单、产量高且特异性高。但是生产周期较长,不是所有抗原都可以采用这个方法,且对那些无免疫性和高毒性的抗原几乎完全无用,主要的是还需要对其进行人源化处理;
2、重组抗体技术。制备周期短、抗原表位多、有效提升了抗体的亲和力,能够减少实验中动物的使用。但是对技术要求较高、产量相对来说更少,相对成本要更高一些;
3、噬菌体展示技术。通过基因技术作用于噬菌体的外壳表达上,让蛋白得以在噬菌体外壳上表达。而后通过相应的分离技术,获得所需蛋白的方式。这个方法需要的技术实力较高,能够达到相应的实力的公司才能使用这个方法;
4、酵母表达技术。先用于蛋白表达的宿主,酵母表达存在着难以比拟的优势。价格便宜、适合大规模生产等特点,但是转化率相对要低一些;
5、杆状病毒表达系统。是常见的昆虫表达系统,具备较好的安全性,外源基因容量大、目的蛋白表达水平高等优点。但是培养成本高,而且难以形成种子批;
6、哺乳动物表达系统。使用广,适合大批量生产。但是需要大量使用到动物,而且可能需要人源化后才能使用;
从如上一些分析我们不难看出,每个方法都纯在着优势和不足,所以,针对不同的需求,我们需要考虑当前适合的方法。还是我们常说的那句话,没有完美的方法,只有适合的方法。义翘神州为广大用户提供抗体制备和抗体定制服务,如果您有相关需求,欢迎来电咨询。
抗体的生产制备历史和工艺决定了抗体生产的质量和类型。抗体生产制备工艺可分为三个阶段:传统方法免疫动物获得抗体、应用杂交瘤技术制备抗体和基因工程技术制备抗体。
1、传统方法免疫动物制备抗体:将通过各种方法获得的免疫原(抗原)注射至动物(比如大鼠、小鼠和兔等)体内,刺激动物体内B细胞分化成熟,产生、分泌抗体,再通过收集动物血清,分离纯化而获得成品抗体。由于早期免疫原制备、纯化技术和成本限制,早期通过传统方法制备的抗体多为多克隆抗体。此种方法成本相对较低,但需要使用大量动物,容易导致“虐待动物”,甚至会因为虐待动物而遭天价罚款,并禁止多克隆抗体销售。
2、应用杂交瘤技术制备抗体:1975年英国科学家Milstein和法国科学家Kohler将鼠源的B淋巴细胞同肿瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,杂交瘤细胞即具有B细胞的抗体生产、分泌功能,又具有肿瘤细胞的无限增殖功能。工艺上,首先采用皮下注射、腹腔注射和血管内注射等方式向动物体内注射免疫原,刺激动物产生特定的B细胞;然后处死动物,收集脾脏B细胞;体外融合B细胞和肿瘤细胞制备杂交瘤细胞,体外筛选、培养杂交瘤细胞;通过体外扩增杂交瘤细胞收集、纯化培养基上清获得抗体,或者在动物体内(血管内、腹腔等)注射杂交瘤细胞、收集和纯化动物体液(腹水、血清等)获得抗体。杂交瘤技术诞生了一代单克隆抗体,这种抗体特异性高,易于大量生产。
3、基因工程技术制备抗体:基因功能技术使得研究者能在体外重组——将任一基因片段插入到特定表达载体(质粒),通过将编辑好的质粒转入特定的细胞系和细胞系的体外扩增、培养,获得基因片段在体外的转录、翻译,从而制备抗体。基因工程技术使得抗体的生产更加快速,并使得人源化抗体更为便捷,进而成为临床应用的抗体药物,用于临床治疗。这一技术产生的抗体是特异性极高的均一抗体,易于工业化大量生产。
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